6-O-Benzylguanine(BG) se yon sibstans chimik enpòtan, ki se yon solid poud blan ak yon estrikti kristal relativman ki estab. Fòmil molekilè a se C12H11N5O, ak nimewo CAS la se 19916-73-5. Li gen yon solubility sèten nan metanol, ak yon solubility nan 20 mg / mL. Anplis de sa, li idrosolubl nan DMF (N, N-dimethylformamide) men solubl nan dlo. Li gen yon pakèt aplikasyon nan domèn medikaman ak byochimik. Li se yon analogue guanine ak yon inibitè nan anzim reparasyon ADN O6 alkyl guanine DNA alkyl transferase (MGMT/AGT). Kòm yon substra AGT, gwoup benzyl li yo transfere nan rezidi sistein nan AGT, irevokabl inaktive AGT ak anpeche reparasyon ADN. Li ka pwovoke apoptoz nan selil timè epi li gen aktivite anti-timè.
|
|
|
|
Fòmil chimik |
C12H11N5O |
|
Mass egzak |
241.10 |
|
Pwa molekilè |
241.25 |
|
m/z |
241.10 (100.0%), 242.10 (13.0%), 242.09 (1.8%) |
|
Analiz elemantè |
C, 59.74; H, 4.60; N, 29.03; O, 6.63 |
Yon richès nan wout teknik posib yo ka itilize pou konplete sentèz chimik la6-O-Benzylguanine. Chak konplo sentetik endepandan posede siperyorite diferan pandan y ap tou akonpaye pa sèten limit inevitab ak feblès.
Nan rechèch pratik ak pwosesis pwodiksyon an, seleksyon an nan apwòch sentèz optimal mande evalyasyon konplè sou plizyè eleman enfliyanman esansyèl, ki kouvri konvenyans akizisyon matyè premyè, dousè kondisyon reyaksyon, nivo pite pwodwi fini ak sede reyaksyon total. Tèz sa a sistematikman prezante plizyè lajman aplike teknoloji entèz endikap pou6-O-Benzylguanine, epi li bay entèpretasyon apwofondi ak detaye konsènan prensip reyaksyon nannan, mekanis chimik ak etap operasyon konkrè eksperimantal nan chak metòd sentetik.
Metòd sentèz
1.1 Matyè premyè ak reyaktif
2-Amino-6-chloropurine (ACP)
Triethylenediamin (DABCO)
Alkòl benzil
Idrir sodyòm
Katalis (tankou katalis transfè faz)
1.2 Etap sentèz
Reyaji 2-amino-6-chloropurine ak triethylenediamine pou jenere DABCO purin entèmedyè. Se etap sa a nan reyaksyon an anjeneral te pote soti nan kondisyon anidrid pou fè pou evite enfliyans nan imidite sou reyaksyon an.Fè reyaksyon sibstitisyon nukleofil ant DABCO purin entèmedyè ak alkòl benzylik anba kataliz idrid sodyòm jenere O-6-benzylguanine. Etap sa a nan reyaksyon an anjeneral mande pou chofaj ankouraje pwogrè nan reyaksyon an, pandan y ap kontwole tan an reyaksyon ak tanperati pou fè pou evite jenerasyon an nan sous-pwodwi.
1.3 Mekanis sentèz
Mekanis reyaksyon apwòch sentetik sa a baze sitou sou reyaksyon sibstitisyon tipik nukleofil. Nan premye etap reyaksyon an, triethylenediamine fonksyone kòm yon reyaktif alkalin, retire atòm klò ki soti nan 2-amino-6-chloropurine epi fòme entèmedyè purin DABCO. Nan etap ki vin apre a, gwoup hydroxyl ki sòti nan alkòl benzyl sèvi kòm yon ajan nukleofil, atake sit nitwojèn nan entèmedyè purin DABCO, finalman bay pwodwi sib O-6-benzylguanine ansanm ak sibstans ki koresponn ak gwoup kite.
1.4 Pirifikasyon pwodwi
Apre reyaksyon an fini, pwodwi brit la jwenn nan etap tankou filtraj, lave, ak siye. Lè sa a, pwodwi brit la te pirifye lè l sèvi avèk metòd tankou kolòn kwomatografi ak rekristalizasyon pou jwenn gwo -pite O-6-benzylguanine. Metòd sentèz lè l sèvi avèk 6-chloroguanine kòm matyè premyè. Matyè premyè ak reyaktif:
- 6-klowoguanin
- Alkòl benzil
- Katalis (tankou katalis transfè faz)
- Alkali (tankou idroksid sodyòm)
6-chloroguanine sibi reyaksyon chimik ak alkòl benzyl anba aksyon konjwen katalis ak sibstans alkalin pou fè sentèz pwodwi sib O-6-benzylguanine. Pwosesis reyaksyon sa a jeneralman mande pou chofaj kontinyèl ak brase inifòm pou efektivman akselere to reyaksyon an epi fasilite pwogresyon reyaksyon ase. Yon fwa reyaksyon an fini, pwodwi brit yo ka kolekte atravè filtraj, lave ak siye pwosedi yo. Apre sa, chromatografi kolòn ak rkristalizasyon yo adopte rafine echantiyon an brit, konsa tankou jwenn gwo-pite O-6-benzylguanine pwodwi fini.
2.1 Mekanis sentèz
Mekanis nan metòd sentèz sa a sitou enplike reyaksyon sibstitisyon. Nan reyaksyon an, gwoup hydroxyl alkòl benzyl la aji kòm yon nukleofil pou atake atòm klò nan 6-chloroguanine, jenere O-6-benzylguanine ak gwoup ki koresponn lan. Prezans nan katalis ak baz ka akselere reyaksyon an ak ogmante sede a nan pwodwi yo. Menm jan ak metòd ki pi wo a, pirifye nan pwodwi brit la obligatwa apre reyaksyon an fini. Segondè pite O-6-benzylguanine ka jwenn nan metòd tankou kolòn kwomatografi ak rkristalizasyon.
-Diseksyon pwofondè nan mekanis molekilè a
Nwayo Mekanis Molekilè: Inaktivasyon irevokabl nan MGMT, Bloke Reparasyon ADN
Konpetisyon substrate ak modifikasyon kovalan
6-O-Benzylguanine(O6BG), kòm yon analogue guanine, konpetitivman mare nan anzim reparasyon ADN MGMT (O6-alkylguanine ADN alkyltransferase) pa imite estrikti nan sit domaj ADN (O6-alkylguanine).Reaksyon kle: Gwoup benzyl nan O6BG transfere nan cysteiny145 rezidi kovalan CMG a (CMG) sa ki lakòz inaktivasyon irevokabl nan anzim la.Sinetik anzim: Reyaksyon sa a se yon sèl pwosesis katalitik, ak chak molekil nan MGMT ka sèlman inaktive yon molekil nan O6BG, sa ki lakòz "anpèchman swisid".
Bloke chemen reparasyon ADN
MGMT se sèl anzim nan selil la ki dirèkteman repare domaj O6-alkylguanine. Inaktivasyon li yo mennen nan: Akimilasyon domaj ajan alkylant: tankou temozolomid (TMZ), dwòg chimyoterapi pwovoke O6-methylguanine ki pa ka repare, ki mennen nan dezakò ADN (pèchman ak timin).Arete Sik Selilè: Domaj ADN aktive chemen siyal p53 la, pwovoke arèstasyon sik selilè oswa efè apoptetik letal (G2/M). MGMT-defisi timè, O6BG konbine avèk ajan alkylating ka oaza touye selil kansè yo, pandan y ap selil nòmal yo gen mwens afekte akòz pi ba ekspresyon MGMT.
Validasyon milti-aktivite antitumoral
Done eksperimantal nan vitro
Sansiblite liy selilè: selil kansè nan pankreyas L3.6pl montre apoptoz ki depann de dòz -O6BG (50 ug/mL, 48 èdtan), ak yon IC50 50 ug/mL.
Règleman ekspresyon pwoteyin: Règleman anba -: MGMT, pwoteyin sik selil B1/B2/A, p53, Ki-67 (makè pwoliferasyon); Regilasyon: p21 (pwoteyin inhibitor sik selil), cytochrome C, Caspase-9 (pwoteyin ekzekisyon apoptoz); diminye ekspresyon mRNA nan MGMT, bloke sentèz li yo.
Modèl bèt nan vivo
Modèl xenograft kansè nan pankreyas: Yo te enjekte sourit gason toutouni ak O6BG (100 ug) ki te konbine avèk gemcitabine (100 mg/kg) chak jou. Apre 35 jou, volim ak pwa medyòm timè a te siyifikativman redwi. Efè sansibilizasyon chimyoterapi: O6BG amelyore sansiblite selil kansè pankreyas yo nan gemcitabine pa 3 fwa, mekanis ki enplike anpèchman reparasyon ADN MGMT-medyatè.
Etid preklinik
Modèl neroblastoma: O6BG amelyore aktivite anti-timè TMZ + irinotecan, pwolonje siviv. Rezistans ranvèse: Lè yo anpeche MGMT, O6BG simonte rezistans selil timè yo nan ajan alkylating, retabli efikasite chimyoterapi.
-Analiz pwofondè nan estrikti molekilè ak relasyon farmakodinamik
Baz estriktirèl
Fòmil chimik molekilè defini kòm $\\ce{C12H11N5O}$, ak mas molekilè relatif la rive nan 241.25. Konpoze a gen gwoup fonksyonèl karakteristik. Gwoup benzoyloxy (-OCH₂Ph) sèvi kòm yon analòg nan ajan alkylating, pandan y ap zo rèl do 2-aminopurine konstwi yon kad estriktirèl ki sanble ak baz ADN natirèl. An tèm de pwopriyete solubilite, li fonn nan 48 mg / mL nan DMSO ak 12 mg / mL nan etanòl. Sibstans la diman fonn nan solisyon akeuz, kidonk li bezwen yo dwe fòmile nan solisyon stock ak solvang òganik pou itilizasyon eksperimantal ki vin apre.
Relasyon aktivite estriktirèl (SAR)
Aplikasyon Klinik kandida ak defi Ekspansyon endikasyon
Endikasyon ekspansyon
Chimyoterapi konbinezon: O6BG te antre nan esè klinik pou amelyore efikasite TMZ kont glioblastom ak melanom.
Terapi sible: Devlope yon twous deteksyon metilasyon pwomotè MGMT pou idantifye popilasyon ki sansib pou O6BG-.
Mekanis rezistans
Ekspresyon MGMT: Gen kèk timè retabli aktivite MGMT atravè anplifikasyon jèn oswa règleman epigenetik, sa ki nesesè konbinezon ak inibitè epigenetik (egzanp, inibitè DNMT).
Optimizasyon sekirite
Jesyon Toksisite: O6BG te demontre bon tolerans nan etid sou bèt, men siveyans pou efè segondè potansyèl tankou repwesyon mwèl zo obligatwa.
Sistèm livrezon: Nanopartikul oswa teknoloji enkapsulasyon lipozomal ka amelyore vize O6BG.
reyaksyon negatif
Malgre ke O6-BG gen potansyèl pou amelyore efikasite chimyoterapi, itilizasyon li yo ka lakòz plizyè reyaksyon sistemik negatif, sitou ki enplike aspè sa yo:
Toksisite ematolojik
Li ka amelyore toksisite mwèl zo nan ajan alkylant, ki mennen nan yon diminisyon nan globil blan ak plakèt. Pou egzanp, lè yo itilize nan konbinezon ak temozolomid, pasyan yo ka fè eksperyans netropeni (ensidans apeprè 30% -50%) ak tronbositopeni (apeprè 20% -40%), ak ka grav yo ka mande tretman reta oswa ajisteman dòz. Itilizasyon alontèm ka lakòz anemi akòz anpèchman pwodiksyon globil wouj nan san, ki manifeste kòm fatig ak vètij, ak siveyans regilye nan nivo emoglobin nesesè.
Repons sistèm dijestif la
Kè plen ak vomisman: souvan wè nan rejim chimyoterapi konbinezon, ak yon pousantaj ensidans nan apeprè 40% -60%, ka gen rapò ak eksitasyon dwòg nan mukoza gastwoentestinal oswa sistèm nève santral la.
Fonksyon fwa nòmal: Yon ti kantite pasyan ka fè eksperyans nivo transaminaz ki wo (ALT/AST ↑), ki endike domaj selil fwa epi ki mande siveyans regilye nan fonksyon fwa. Ogmantasyon fado metabolik sou fwa a mennen nan estrès nan selil fwa yo.
Referans
Kreklau EL, Kurpad C, Williams DA, et al. Pwolonje anpèchman MGMT nan selil timè imen pa 6 OBenzylguanine nan vitro ak nan vivo [J]. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 1999, 291 (3): 1042-1049. PMID: 10565851.
Blumenthal D T. Yon etid faz III nan terapi radyasyon plis 6 OBenzylguanine ak BCNU kont RT ak BCNU pou kont li nan glioblastom ki fèk dyagnostike [J]. Jounal Entènasyonal nan nkoloji klinik, 2015, 20 (4): 650-658. DOI: 10.1007/s10147-014-0769-0.
Tintoré M, Grijalvo S, Fàbrega C, et al. Sentèz oligonukleotid ki pote fluorescent O6-alkylguanine pou mezire aktivite MGMT [J]. Bioorganic & Medikal Chimi Lèt, 2015, 25 (22): 5208-5211. DOI: 10.1016/j.bmcl.2015.09.065.
Wang L, Zhang Y, Liu H. 6 OBenzylguanine amelyore chemosensitivity nan selil kansè nan pankreyas pa anpeche MGMT-medyatè reparasyon ADN[J]. Chinese Journal of Clinical Oncology, 2020, 47 (8): 415-421. (nan Chinwa)
Quinn JA, Jiang SX, Reardon DA, et al. Faz II esè temozolomid plis 6 OBenzylguanine nan adilt ki gen gliom malfezan ki reziste ak temozolomid-rekouran [J]. Journal of klinik nkoloji, 2009, 27 (8): 1262-1267. DOI: 10.1200/JCO.2008.18.8417.
FAQ
Konpoze sa a parèt tankou pi solid cristalline blan anba kondisyon tanperati chanm konvansyonèl yo. Li prezante konfigirasyon molekilè entèn kontra ak fiks, ki montre pèfòmans solubilite modere nan divès solvang òganik polè, ansanm ak ekselan estabilite chimik nannan. Lè yo estoke nan anviwònman prezèvasyon regilye, sibstans la ka piti piti kenbe fòm orijinal fizik li yo ak pwopriyete nannan san yo pa dekonpozisyon estriktirèl oswa deteryorasyon kalite.
Li fonksyone kòm yon entèmedyè derive enpòtan nan asid nikleyik ak valè aplikasyon segondè. Li se sitou aplike nan divès domèn tankou rechèch byomedikal debaz, eksplorasyon famasi timè ak analiz eksperimantal ki gen rapò ak jenetik-. Anplis, li aji kòm yon matyè premyè fondamantal endispansab pou rechèch ak devlopman sibstans aktif vize ki aplike nan terapi anti-kansè.
Konpoze sa a gen yon estrikti fonksyonèl ki diferan ak benzyl-ranplase byen fèm ak kilè eskèlèt molekilè guanin fondamantal la, ki bay li ak reyaksyon chimik enpòtan ak wòdpòte. Li ka angaje aktivman nan gwo-presizyon modifikasyon estriktirèl selektif ak reyaksyon kouple entèmolekilè vize biomolekil asid nikleyik. Pandan se tan, li se kapab fleksib reglemante ak optimize nannan karakteristik byolojik, rezonab modulation entansite bioaktivite ki enpòtan, konsa tankou konplè akomode demand pratik varye ak konplèks nan eksplorasyon byochimik, rechèch byoloji molekilè ak òganik domèn preparasyon sentetik.
Li oblije byen sele pwodwi fini a epi mete l nan yon zòn depo fre ak sèk, kenbe li konplètman pwoteje kont limyè solèy la dirèk entans ak ekspoze limyè piman bouk. Pandan prezèvasyon chak jou, yo ta dwe kenbe materyèl la byen lwen lè imid, anviwònman tanperati ki wo - ak divès kalite sibstans chimik korozif, yon fason efikas pou evite chanjman estrikti molekilè entèn yo ak deteryorasyon kalite irevokabl. Metòd depo syantifik ak estandadize ka byen kenbe aktivite biyolojik ki estab nannan li yo ak pite chimik orijinal segondè, epi garanti bon jan kalite pèfòmans serye pandan tout tan -prezèvasyon ak aplikasyon pratik.
Baj popilè: 6-o-benzylguanine cas 19916-73-5, founisè, manifaktirè, faktori, wholesale, achte, pri, esansyèl, pou vann