DL-Dithiotreitol CAS 3483-12-3

DL-ditiotreitol(DTT pou kout) se yon ti molekil òganik diminye ajan ak fòmil chimik C4H10O2S2. Li se yon molekil lineyè nan eta redwi, epi li vin yon estrikti bag sis manm ki gen lyezon disulfid apre oksidasyon. Non dithiothreitol soti nan threose, yon monosakarid kat kabòn. Izomè DTT se dithioerythritol (DTE), ki se C3 epimèr DTT. Soluble nan dlo.

Paske li fasil pou soksid pa lè, estabilite nan DTT se pòv; Sepandan, konjelasyon depo oswa tretman nan gaz inaktif ka pwolonje lavi sèvis li yo. Akòz nukleofilisite ki ba nan souf protonate, rediksyon efikas nan DTT diminye ak diminisyon nan pH; Tris (2-carboxyethyl) fosfat HCl (TCEP hydrochloride) ka itilize kòm yon ranplasan pou DTT nan pH ba epi li pi estab pase DTT.

1. Youn nan itilizasyon DTT se kòm yon redukteur ak deprotektè nan ADN thiolated. Atòm souf nan fen ADN thiolated yo gen tandans fòme dimè nan solisyon, espesyalman nan prezans oksijèn. Dimerization sa a redwi anpil efikasite nan kèk eksperyans reyaksyon kouple (tankou fikse ADN nan byodetèktè); Anplis de sa nan DTT nan solisyon ADN la ka diminye dimerizasyon ADN la lè yo retire li apre yon peryòd reyaksyon.

2. DTT se tou souvan itilize pou rediksyon nan lyezon disulfide nan pwoteyin, ki ka itilize yo anpeche fòmasyon an nan pwoteyin intramolecular oswa intermolecular lyezon disulfid ant cysteine ​​nan pwoteyin. Sepandan, DTT souvan pa kapab diminye lyezon disulfide ki entegre nan estrikti pwoteyin (inaksesib a solvang). Rediksyon nan lyezon disulfid sa yo souvan mande pou denaturasyon pwoteyin (chofaj tanperati ki wo oswa ajoute denaturants, tankou 6M guanidine idroklorid, 8M ure oswa 1 pousan SDS). Okontrè, selon pousantaj rediksyon diferan nan lyezon disulfide nan prezans DTT, yo ka detèmine pwofondè nan embedment li yo.

Pou nouvo metòd sentèz dithiothreitol, konsomasyon materyèl bwit yo kalkile dapre pwodiksyon pwodwi teyorik 277.6g, ki gen ladan etap sa yo:

a. Ajoute 162.5g (1.80mol) nan 1,4-butenediol nan chodyè reyaksyon an, tou dousman degoute 316.8g (1.98mol) nan brom likid anba kondisyon an vibran, brase pou 16 èdtan anba tanperati a nan 25 degre apre jete, rete kanpe pou kouch, pran supernatant la, epi answit jwenn 2,3-dibromo-1,4-butanediol. Sere li nan yon tank ak tanperati ki pi ba pase 30 degre pou sibstiti;

b. Nan supernatant ki te jwenn nan etap a, yo ajoute 651.2g (4.88mol) nan solisyon idroksid sodyòm ak yon konsantrasyon mas pousan nan 30 pousan, epi yo brase reyaksyon an nan yon tanperati ki pi ba pase 20 degre pou 16 èdtan jwenn oksid etilèn;

c. Ajoute 155.67g (2.045mol) asid thioacetic nan solisyon reyaksyon yo te jwenn nan etap b, brase epi reyaji pou 20 èdtan, distile anba presyon redwi, epi kristalize pou jwenn dithiothreitol dyacetate;

d. Nan kristalizasyon an jwenn nan etap c, yo ajoute 190.9g (1.432mol) nan solisyon idroksid sodyòm ak yon konsantrasyon mas pousan nan 30 pousan, brase pou reyaksyon pou 4 èdtan, refwadi nan tanperati chanm, ajiste pH nan. 7.5 ~ 8.0 ak solisyon asid idroklorik ak yon konsantrasyon mas pousan nan 3 pousan, ekstrè ak 300mL acetate etil, konbine kouch òganik yo, distile anba presyon nòmal yo retire acetate etil, ak Lè sa a, distile solisyon an rezidyèl konsantre anba presyon redwi nan yon vakyòm. nan 15mmHg ak yon tanperati 180 ~ 200 degre, distile a ak tanperati ant 130 ~ 140 degre yo te kolekte epi refwadi nan tanperati chanm yo jwenn 100g nan blan solid dithiothreitol ak sede nan 36.02 pousan.

DTT se yon ajan rediksyon fò, ak rediksyon li yo se lajman akòz estabilite konformasyon nan bag oksidize sis manm li yo (ki gen kosyon disulfid). Potansyèl redox li se -0.33 V nan pH 7. Rediksyon yon lyezon disulfid tipik pa dithiothreitol konsiste de de reyaksyon echanj lyezon disulfide mercapto youn apre lòt.

Pami yo, eta a entèmedyè ki te fòme nan premye etap la nan reyaksyon an trè enstab, paske dezyèm gwoup sulfhydryl la sou DTT a gen tandans konekte ak atòm nan souf oksidize, se konsa ke eta a entèmedyè byen vit transfòme nan estrikti a oksidasyon siklik nan la. DTT, konsa ranpli rediksyon an nan kosyon disulfid la.

Pouvwa a diminye nan DTT afekte pa valè pH la, epi li ka sèlman jwe yon wòl rediksyon lè valè pH la pi gran pase 7. Sa a se paske se sèlman anyon mercaptan protonated (-S -) ki gen reyaksyon, pandan y ap mercaptan (-SH). ) pa fè sa; PKa nan gwoup thiol se jeneralman ~ 8.3.

Paske li fasil pou soksid pa lè, estabilite nan DTT se pòv; Sepandan, konjelasyon depo oswa tretman nan gaz inaktif ka pwolonje lavi sèvis li yo. Akòz nukleofilisite ki ba nan souf protonate, rediksyon efikas nan DTT diminye ak diminisyon nan pH; Tris (2-carboxyethyl) fosfat HCl (TCEP hydrochloride) ka itilize kòm yon ranplasan pou DTT nan pH ba epi li pi estab pase DTT.

Baj popilè: dl-dithiothreitol cas 3483-12-3, founisè, manifaktirè, faktori, wholesale, achte, pri, esansyèl, pou vann