Eleman debaz la nanIGF 1 LR3 esprese IGF-1 LR3 (Long R3 Ensilin tankou Faktè Kwasans-1), yon analòg ensilin-like kwasans-1 (IGF-1). Li ka ranvèse pèt nan misk pa anpeche dekonpozisyon pwoteyin ak fè pwomosyon sentèz nan misk, men kounye a limite a sa sèlman etid preklinik. Eksperyans sou bèt yo te montre ke IGF-1 LR3 ka amelyore estrikti fib nan misk, men esè imen poko fèt. Efè nerotwofik IGF-1 LR3 ka ankouraje rejenerasyon axonal ak siviv newòn, men kapasite li pou antre baryè san-sèvo a bezwen plis validation. Li akselere gerizon blesi pa ankouraje pwopagasyon fibroblast, men yo ta dwe pran prekosyon kont risk ipoglisemi.
|
|
|
IGF 1 LR3 COA
Matyè premyè ak modifikasyon jeni jenetik
teknoloji kle pwodwi yo
Gene sous ak seleksyon lame
IGF 1 LR3 espreyo pwodui atravè teknoloji recombination jenetik, epi sekans jèn li yo modifye dapre ensilin imen -faktè kwasans-1 (IGF-1). Se lame a pou ekspresyon anjeneral chwazi nan Escherichia coli (tankou tansyon COH) oswa selil mamifè (tankou selil CHO), nan mitan ki sistèm nan E. coli lajman itilize akòz efikasite segondè li yo ak pri ki ba nan fèmantasyon segondè-dansite.
Modifikasyon sekans asid amine
Mitasyon R3: Twazyèm asid amine natirèl IGF -1 se asid glutamik (Glu), ki ranplase pa arjinin (Arg) pa IGF-1 LR3, ki fòme makè "R3". Mitasyon sa a siyifikativman diminye afinite li yo pou pwoteyin obligatwa faktè kwasans ki sanble ak ensilin (IGFBPs), ogmante konsantrasyon gratis li yo pa plis pase 1000 fwa, ak amelyore aktivite byolojik li yo pa 2-3 fwa.
N-tèminal ekstansyon: Ajoute 13 résidus asid amine nan fen chèn B la pou fòme yon estrikti chèn 83 asid amine (kèk literati mansyone 93 asid amine, ki ka akòz diferans ki genyen nan pwosesis pirifikasyon oswa metòd deteksyon), plis optimize fonksyon li yo.
Pwosesis fèmantasyon ak pirifikasyon
pwosesis fèmantasyon
Segondè dansite fèmantasyon: ekspresyon Escherichia coli pwovoke pa chòk chalè a 42 degre, ak tank fèmantasyon an ka rive nan yon kapasite de 50L. Pwoteyin sib la reprezante 30% -40% nan total pwoteyin bakteri an.
Optimizasyon mwayen kilti: Kontwole akimilasyon metabolik byproducts (tankou asid acetic) ak amelyore pite pwodwi atravè estrateji kiltivasyon pakèt manje.
Pwosesis pou pirifye
Etap ki graj ak pi:
Chromatografi echanj iyon: itilize separasyon diferans chaj pwoteyin pou ogmante pite a plis pase 90%.
Kwomatografi entèraksyon idrofob: plis retire enpurte, reyalize yon pite plis pase 95%.
Etap pi:
Kwomatografi esklizyon molekilè (SEC-HPLC): Separe pwoteyin sib de dimè oswa oligomè ak yon pite ki pi gran pase oswa egal a 95% (detekte pa SDS-PAGE).
Konsantrasyon ultrafiltrasyon: Konsantre pwoteyin nan lè l sèvi avèk teknoloji filtraj koule tanjansyèl, pandan y ap ranplase tanpon an ak sistèm PBS (pH 7.4).
Filtrasyon tèminal: Sèvi ak manbràn filtre 0.22 μ m pou esterilizasyon pou asire esterilite.
kontwòl kalite
Verifikasyon Aktivite: Aktivite byolojik la te mezire pa tès pwopagasyon san serom nan selil kansè nan tete imen MCF-7, ak valè ED50 la te mwens pase oswa egal a 1.5 ng/mL.
Tès pite: SDS-PAGE ak SEC-HPLC konbine deteksyon, pite Pi gran pase oswa egal a 95%.
Kontwòl enpurte: kontni endotoxin Mwens pase oswa egal a 10 EU/mg, rezidi pwoteyin lame Mwens pase oswa egal a 0.005%, rezidi ADN ekzojèn Mwens pase oswa egal a 10 ng/mg.
Pwosesis preparasyon ak estabilite
Fòmil pwoteksyon seche friz
Sèvi ak 8% trehalose oswa 5% mannitol kòm pwoteksyon friz-seche, konbine avèk 0.01% Tween 80 (solubilizer), pwoteyin likid konvèti an poud blan atravè teknoloji friz-seche, ak yon kontni imidite ki mwens pase 3%.
Estabilite garanti
Depo alontèm
Poud seche friz ka estoke pou 36 mwa nan -20 degre a -80 degre, epi apre rekonstitisyon, li ka mete nan kondisyon esteril nan -20 degre a -80 degre pou 6 mwa, ak nan 2 degre a 8 degre pou 7-10 jou.
Kondisyon transpò: pake glas ble yo refrijere pou transpò, asire ke tanperati a kenbe nan 2-8 degre epi evite konjelasyon repete ak dekonjle.
Ekipman pwodiksyon ak konfòmite GMP
Ekipman debaz
Sistèm fèmantasyon: tank fèmantasyon totalman otomatik 50L (ekipe ak pH, oksijèn ki fonn, sistèm siveyans tanperati sou entènèt).
Sistèm pirifikasyon: AKTA Avant purifikateur pwoteyin (sipòte separasyon kwomatografik otomatik).
Ekipman pou preparasyon: Mini espre seche rad B-290 (seche rad espre) oswa machin friz-seche (pou preparasyon poud).
Enstriman analitik: HPLC-MS (konfimasyon pwa molekilè), analizè dinamik limyè gaye (deteksyon distribisyon gwosè patikil), anzim -lye tès imunosorban (ELISA).
Konfòmite GMP
Anviwònman pwodiksyon an konfòme ak "Bon Pratik Faktori pou Dwòg (Revize an 2010)" epi li kontwole entèdi endikatè tankou endotoxin bakteri ak rezidi pwoteyin lame.
Bay bon jan kalite dokiman konplè, ki gen ladan COA (Sètifika Kalite), MSDS (Fèy Done Sekirite), ak dokiman sipò regilasyon.
IGF 1 LR3 Spray defòme fenotip metabolik la ak diferansyasyon fonksyonèl selil glial yo.
IGF 1 LR3 esprese yon preparasyon ki gen IGF-1 konpozan LR3, ki se yon faktè kwasans atifisyèlman modifye -ensilin ki dire lontan-. Li gen pi wo aktivite pase natirèl IGF-1, yon pi long mwatye lavi nan kò a, ak pi bon efè pwomosyon kwasans, ki ka ankouraje divizyon an, migrasyon, ak diferansyasyon nan pifò selil yo. Nan jaden an nan medikaman, IGF-1 LR3 te resevwa anpil atansyon akòz karakteristik inik byolojik li yo epi li te etidye pou eksplore potansyèl la terapetik nan divès maladi.
Selil glial yo se yon eleman enpòtan nan sistèm nève santral la, ki gen ladan mikroglia, astwosit, ak lòt moun. Yo jwe yon wòl endispansab nan kenbe fonksyon nòmal nan sistèm nève a, sipòte siviv newòn, ak patisipe nan repons iminitè yo. Fenotip metabolik la ak estati fonksyonèl selil glial yo gen rapò ak sante sistèm nève a, e nenpòt faktè ki afekte metabolis ak fonksyon yo ka gen yon enpak siyifikatif sou sistèm nève a.
Fenotip metabolik ak fonksyon selil glial yo
Kalite ak distribisyon selil glial yo
Selil glial yo nan sistèm nève santral la sitou gen ladan mikroglia ak astwosit. Microglia yo se selil iminitè nan sistèm nève santral la, lajman distribiye nan sèvo a ak kòd epinyè a. Yo aji kòm "gadyen yo" nan sistèm nève a, toujou ap kontwole chanjman nan anviwònman an ki antoure ak jwe yon wòl enpòtan nan kenbe omeyostazi iminitè a nan sistèm nève a.Astrosit yo se kalite ki pi abondan nan selil glial nan sistèm nève santral la, posede divès fòm ak fonksyon. Astrosit fòme koneksyon sere ak newòn, veso sangen, elatriye atravè pwosesis yo, patisipe nan fòmasyon nan baryè san -sèvo, bay sipò nitrisyonèl nan newòn, kontwole absòpsyon ak metabolis nerotransmeteur, epi yo gen yon enpak enpòtan sou fonksyon nòmal newòn yo ak transmisyon siyal neral yo.
Fenotip metabolik nan selil glial nòmal
Anba kondisyon fizyolojik nòmal, selil glial yo gen fenotip metabolik espesifik. Microglia fè fonksyon siveyans iminitè nan yon eta repo, ak aktivite metabolik yo relativman ba, sitou repoze sou wout fosforilasyon oksidatif pou jwenn enèji. Lè yo ankouraje pa envazyon patojèn, domaj tisi, elatriye, microglia yo aktive, ak fenotip metabolik yo sibi chanjman enpòtan, deplase nan direksyon yon mòd metabolik domine pa glikoliz, rapidman pwodwi enèji ak molekil byoaktif pou fè fas ak defi ekstèn. Yo bay sipò enèji pou tèt yo ak newòn atravè oksidasyon aerobic lè yo enjere glikoz. An menm tan an, astrocytes tou patisipe nan sik la glutamate glutamine, konvèti glutamate lage pa newòn nan glutamin ak transpòte li tounen nan newòn yo sentèz glutamate ankò. Pwosesis sa a enpòtan anpil pou kenbe balans nerotransmetè ak fonksyon nòmal newòn.
Fonksyon selil glial yo
Selil glial yo gen plizyè fonksyon enpòtan nan sistèm nève santral la. Kòm selil iminitè, microglia ka rekonèt ak elimine patojèn, selil ki domaje, ak total pwoteyin nòmal, epi patisipe nan règleman an nan repons neroenflamatwa. Pandan devlopman neral, microglia patisipe tou nan koupe sinaptik, ede fòme koneksyon nòmal yo nan sikui neral yo.
Fonksyon astwosit yo pi vaste. Yo pa sèlman bay sipò nitrisyonèl ak estriktirèl pou newòn, men tou, yo patisipe nan reglemante liberasyon an ak absorption nan nerotransmeteur, kenbe omeyostazi nerotransmeteur. Anplis de sa, astwosit kontwole sikilasyon san serebral epi patisipe nan kenbe fonksyon baryè san -sèvo a lè yo kominike avèk veso sangen yo, pwoteje sistèm nève a kont sibstans danjere nan periferik la.
Efè IGF-1 LR3 Flite sou fenotip metabolik defòme selil glial yo.
Chanjman nan chemen metabolik yo
IGF-1 LR3 nan IGF-1 LR3 Spray ka aktive chemen siyal en an pa mare nan reseptè IGF-1 sou sifas selil glial yo, kidonk afekte chemen metabolik selil glial yo. An tèm de metabolis enèji, aktivasyon chemen siyal IGF-1 la ka ankouraje tranzisyon selil glial yo soti nan fosforilasyon oksidatif nan glikoliz. Nan sikonstans nòmal, fosforilasyon oksidatif se fason prensipal selil yo pwodwi enèji, ak efikasite segondè, men vitès relativman dousman; Malgre ke glikoliz pwodui mwens enèji, li ka byen vit bay enèji nan yon kout peryòd de tan.
Lè IGF-1 LR3 aji sou selil glial yo, li ka ogmante ekspresyon de anzim glikolitik ak amelyore aktivite glikolitik pa aktive chemen siyal tankou PI3K/Akt ak Ras/MAPK. Chanjman nan chemen metabolik sa a ka mennen nan yon "deformation" nan mòd ekipman pou enèji nan selil glial, sa ki lakòz yon règleman nòmal nan metabolis enèji lè yo fè fas a diferan eta fizyolojik oswa patolojik.
Baj popilè: igf 1 lr3 espre, Swèd, manifaktirè, faktori, wholesale, achte, pri, esansyèl, pou vann