L-thioglutamic asidse yon konpoze pwodwi natirèl ki konvèti soti nan précurseurs ki sanble ak glikozinolat nan legim grannymonda tankou chou frize, moutad vèt ak bwokoli. Li gen yon varyete efè sante, epi li lajman itilize pou anpeche maladi kwonik tankou kansè, maladi kadyovaskilè, ak dyabèt. Li se lajman jwenn nan plant krisifè, tankou chou frize, chou, ak chou. Li gen anpil aktivite famasi, tankou antikansè, anti-enflamatwa, antioksidatif, neuroprotective, elatriye Se poutèt sa, metòd la sentetik nan L-thioglutamic asid te atire anpil atansyon.
Kounye a, metòd pou sentèz L-thioglutamic asid ka divize an de kategori: fèmantasyon byolojik ak sentèz chimik. De metòd sa yo dekri an detay anba a.
L-Sulforaphane metòd fèmantasyon byolojik:
Metòd fèmantasyon byolojik la se yon metòd pou fè sentèz konpoze ak mikwo-òganis. Atravè tès depistaj tansyon bakteri ak optimize kondisyon kilti, mikwo-òganis yo ka pwodwi asid L-thioglutamic pandan pwosesis fèmantasyon an. Koulye a, li te jwenn ke anpil tansyon ka sentèz L-thioglutamic asid, tankou Escherichia coli, Streptococcus thermophilus ak sou sa. Pami yo, metòd pou sentèz L-thioglutamic asid pa tansyon reprezante pa Escherichia coli se pi komen an. Etap espesifik yo se jan sa a:
1. Izole tansyon ki pwodui L-thioglutamate, tankou Escherichia coli, nan tè oswa tisi plant;
2. Adopte kondisyon mwayen ak kilti apwopriye, tankou tanperati, valè pH, tan kilti, elatriye, pou kiltive Escherichia coli;
3. Rekòlte bouyon fèmantasyon Escherichia coli, fè sèten pwosesis ak pirifikasyon, epi jwenn asid L-thioglutamic.
L-Sulforaphane metòd sentèz chimik:
Metòd sentèz chimik la se sèvi ak metòd reyaksyon chimik molekilè pou fè sentèz asid L-thioglutamic atravè diferan wout sentetik. Kounye a, metòd sentèz chimik yo sitou divize an kat kalite: metòd sèl kolin, metòd klori sulfuryl, metòd rediksyon carbonyl, ak metòd silfat agarose.
1. Metòd sèl kolin:
Metòd sa a se youn nan metòd yo souvan itilize sentetik. Kontinye jan sa a:
① Premyèman, L-methionine ak kolin reyaji nan kondisyon asid pou jenere yon ranplasan nitwojèn ra nan asid L-thioglutamic.
② Chofaj ak idrolize ranplasan nitwojèn nan asid L-thioglutamic nan kondisyon alkalin.
Avantaj nan metòd sa a se ke reyaksyon an se senp epi fasil metrize, men sede a ba.
2. Metòd klori Sulfonyl:
Metòd sa a itilize reyaksyon sibstitisyon elektwofil pou fè sentèz asid L-thioglutamic. Kontinye jan sa a:
① Reyaksyon L-methionine ak klori sulfonil nan kondisyon alkalin pou jwenn sulfinat asid L-thioglutamic.
② Sulfinat la idrolize anba kondisyon alkalin pou jenere asid L-thioglutamic.
Avantaj nan metòd sa a se ke reyaksyon an fasil pou kontwole ak sede a wo, men li bezwen sèvi ak klori sulfonyl toksik.
3. Metòd rediksyon carbonyl:
Metòd la se itilize reyaksyon rediksyon pou fè sentèz asid L-thioglutamic. Kontinye jan sa a:
①L-methionine reyaji ak asetonimin pou jenere piridin pirimidin-2-en-4-yon sèl ak pirimidin pirimidin-2-en-4-yon-5-sulfat an menm tan.
②Pyrimidine pyrimidine-2-en-4-yon-5-sulfat redwi pou jwenn asid L-thioglutamic.
4. Metòd silfat agaroz: Metòd sa a se reyaji L-methionine ak silfat agarose anba kondisyon asid pou jenere asid L-thioglutamic. Akòz bon aktivite katalitik silfat, efikasite reyaksyon ak selektivite amelyore. Pi wo, men pi ankonbran pou opere.
Nan rechèch syantifik, deteksyon L-sulforaphane trè enpòtan. Pami yo, metòd silfat agarose se youn nan metòd deteksyon klasik yo. Metòd agarose sulfat la ak etap li yo pral dekri an detay anba a.
Prensip eksperimantal
Metòd silfat agaroz la baze sou fòmasyon yon konplèks jòn L-thiogalactopicrin ak silfat baryòm, yon sèl ki fòme nan kondisyon asid, lè l sèvi avèk agarose kòm yon echafodaj pou separe L-Metòd sulforaphane. Metòd la baze sou lefèt ke nan kondisyon asid, konplèks jòn ki te fòme pa reyaksyon silfat barium ak L-sulforaphane pa fasil idrosolubl nan dlo ak presipite nan agarose, konsa tankou separe ak detekte L-sulforaphane.
Etap eksperimantal:
Etap 1: Prepare sispansyon silfat agarose-baryòm
Peze yon kantite apwopriye nan agarose ak silfat barium, ajoute yon sèten kantite dlo distile apre melanje ak byen brase, chalè jiskaske yo fonn oswa respire melanje, filtre sispansyon an ak yon filtè ki gen yon gwosè pò nan 0.22um, ak Lè sa a, bouyi pou 3 a 5 minit. Lè sispansyon an refwadi pi ba pase 50 degre men li toujou pa solidifye, vide solisyon an nan yon plat Petri epi mete l nan tanperati chanm jiskaske li solidifye.
Etap 2: Preparasyon echantiyon ak pwosesis:
Peze echantiyon an oswa estanda yo dwe teste a, ajoute ase {{0}}.01 M solisyon pirofosfat sodyòm pou fonn, ajoute volim korespondan klowofòm pou ekstrè, santrifije pou 10-15 minit. , retire likid kouch anwo a, evapore klowofòm nan kolekte rezidi a, ajoute 2 mL dlo ak 2 mL asid asid konsantre, ekstrè ankò ak klowofò, santrifuje, epi yo te pran kouch anwo a. Pran 24mL nan likid anwo a, ajoute 0.2 mL nan 2 pousan solisyon nitrat kòb kwiv mete ak 0.4 mL nan 5 pousan solisyon nitrat plon, ekstrè yon fwa ak klowofòm, santrifuje, epi pran likid la anwo, ki ka itilize kòm yon echantiyon eksperimantal pou fè tès.
Etap 3: Eksperyans re-analiz:
Echantiyon yo te ajoute nan sispansyon silfat agarose-baryòm ak chofe nan yon beny dlo pou solidifye nan 80 degre pou 2 èdtan. Apre echantiyon an solidifye, sispansyon silfat agarose-baryòm refwadi nan tanperati chanm, epi konplèks echantiyon silfat agarose-baryòm fonn anba kondisyon tanpon asid asid ak sèl amonyòm. Finalman, rense l avèk dlo sekans, epi enspekte vizyèlman koulè konplèks la nan esfè agaroz la.
Etap 4: Analiz rezilta:
Mezire absorbans filtraj la apre re-analiz pou konstwi yon koub estanda, kidonk jwenn kontni L-sulforaphane.
Metòd silfat agarose se yon metòd klasik pou separe ak detekte L-sulforaphane. Atravè yon seri etap, L-sulforaphane ka separe epi detekte kontni li yo. Metòd la gen avantaj ki genyen nan senplisite, sansiblite segondè, ak rezilta egzat, epi li se souvan itilize nan deteksyon an nan L-sulforaphane nan manje, pwodui kosmetik, ak edikaman.
Rezime: Avèk devlopman syans ak teknoloji, metòd sentèz L-thioglutamic asid ap kontinye optimize ak amelyore. An menm tan an, metòd la fèmantasyon byolojik ak metòd la sentèz chimik tou gen avantaj pwòp yo ak dezavantaj, ak ki metòd yo itilize depann sou sitiyasyon aktyèl la.