IPTG(isopropyl) - D-thiogalactoside se yon konpoze atifisyèlman sentetize lajman ki itilize nan byoloji molekilè ak jeni jenetik. IPTG gen yon estrikti ki sanble ak laktoz, men diferan nan pwopriyete chimik. IPTG gen yon seri de pwopriyete reyaksyon, ki gen ladan reyaksyon idroliz, entèraksyon ak laktaz, ak entèraksyon ak lòt anzim. Pwopriyete reyaktif sa yo fè IPTG yon zouti enpòtan pou etidye règleman ekspresyon jèn ak ekspresyon pwoteyin. Lè w ap itilize IPTG pou eksperyans, li nesesè yo peye atansyon sou estabilite li yo ak entèraksyon ak lòt konpoze asire presizyon ak fyab nan rezilta yo eksperimantal.
(Lyen pwodwi 1:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-reagent-cas-367-93-1.html )
(Lyen pwodwi 1:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-powder-cas-367-93-1.html)
1. Reyaksyon idroliz:
IPTG ka sibi reyaksyon idroliz anba tanperati ki wo oswa kondisyon asid. Idwoliz ka mennen nan dekonpozisyon IPTG nan thiogalactosides ak izopropanol. Se poutèt sa, li nesesè pou fè pou evite itilize tanperati ki twò wo oswa kondisyon asid nan eksperyans la pou kenbe estabilite ak aktivite IPTG. Nan eksperyans byolojik, IPTG se souvan itilize pou pwovoke ekspresyon jèn ak kristalizasyon pwoteyin. Mekanis li nan aksyon se pa obligatwa nan lac|pwodwi nan operon laktoz, chanje konfòmasyon li yo, kidonk kite lacO ak plis aktive transcription. Mekanis regilasyon transcriptional inductible sa a fè IPTG jwe yon wòl enpòtan nan règleman ekspresyon jèn.
2. Entèaksyon ak laktaz:
Entèraksyon ki genyen ant IPTG ak laktaz se youn nan reyaksyon ki pi enpòtan li yo. Laktaz se yon anzim ki itilize pou dekonpoze laktoz nan glikoz ak galaktoz. Estrikti IPTG a sanble ak laktoz epi li ka mare nan sit endiksyon laktaz, kidonk aktive transkripsyon laktaz la. Entèraksyon sa a fè IPTG yon zouti enpòtan pou etidye règleman ekspresyon jèn ak ekspresyon pwoteyin.
Entèraksyon ki genyen ant IPTG ak laktaz se yon sijè rechèch enpòtan nan jaden an nan byochimik. Laktaz se yon anzim ki ka kraze laktoz nan galaktoz ak glikoz, pandan y ap IPTG se yon pwovoke ki ka pwovoke ekspresyon laktaz.
Premyèman, kite a pran yon gade nan laktaz. Laktaz se yon kalite anzim ki pwodui pa - Yon anzim konplèks ki konpoze de galaktozidaz ak asetiltransferaz. Fonksyon li se kraze laktoz nan galaktoz ak glikoz, pou kò a ka absòbe ak itilize monosakarid sa yo. Nan mamifè, aktivite laktaz tipikman piti piti diminye apre sevraj, sa ki fè li difisil pou bèt adilt yo dijere laktoz. Sepandan, nan kèk mikwo-òganis, aktivite laktaz la wo, sa ki pèmèt yo grandi ak repwodui nan pwodwi letye.
Entèraksyon ki genyen ant IPTG ak laktaz sitou enplike nan pwovoke ekspresyon nan laktaz. Nan operon laktoz, lak|se yon jèn regilasyon ki kode yon pwoteyin represeur. Fonksyon lac|pwodwi se kontwole - ekspresyon de galactosidase. Nan absans laktoz, konfòmasyon lac|chanjman pwodwi, koule soti nan sit la obligatwa nan pwomotè a, ki pèmèt RNA polymerase mare nan pwomotè a ak transkri - Jèn nan pou galactosidase. Sepandan, lè IPTG mare nan lac|pwodwi yo, li pwovoke chanjman konformasyon, sa ki lakòz lac|pwodwi yo kite sit la obligatwa nan pwomotè a, kidonk aktive transcription. Mekanis regilasyon transcriptional inductible sa a fè IPTG jwe yon wòl enpòtan nan règleman ekspresyon jèn.
Anplis pwovoke ekspresyon laktaz, IPTG kapab tou ankouraje kristalizasyon pwoteyin. Nan eksperyans kristalizasyon pwoteyin, IPTG, kòm yon derive ki pa natirèl asid amine, ka mare nan sèten pwoteyin ak pwovoke kristalizasyon yo. Kapasite sa a pou pwovoke kristalizasyon fè IPTG yon reyaktif eksperimantal byolojik enpòtan.
3. Entèaksyon ak lòt anzim:
Anplis laktaz, IPTG ka kominike tou ak lòt anzim. Pou egzanp, IPTG ka - Galactosidase hydrolyzes yo pwodwi thiogalactoside ak izopropanol. Entèraksyon sa a ka afekte rezilta eksperimantal yo, kidonk li nesesè pou konsidere reyaksyon posib ant IPTG ak lòt anzim lè w ap desine eksperyans lan.
4. Entèaksyon ak metabolis entraselilè:
To metabolik IPTG nan selil yo relativman dousman, kidonk enpak li sou kwasans selil ak metabolis relativman piti. Sepandan, nan kèk ka, pwosesis metabolik entraselilè ka gen yon enpak sou IPTG. Pou egzanp, konpetisyon substra nan selil yo ka afekte entèraksyon ki genyen ant IPTG ak laktaz. Se poutèt sa, li nesesè yo peye atansyon sou enpak potansyèl metabolis entraselilè sou IPTG nan eksperyans.
Metabolism entraselilè refere a reyaksyon chimik jeneral nan yon selil, ki gen ladan metabolis glikoz, metabolis grès, metabolis pwoteyin, elatriye. Pwosesis metabolik sa yo enpòtan anpil pou siviv ak fonksyon selil yo. Kòm yon konpoze ekzojèn, IPTG ka kominike avèk sèten eleman nan selil yo, kidonk afekte metabolis entraselilè.
Premyèman, IPTG ka afekte metabolis glikoz. Metabolis sik se youn nan pwosesis metabolik ki pi enpòtan nan selil yo, ki gen ladan dekonpozisyon ak sentèz sik. Nan kèk ka, IPTG ka pwovoke - Aktivite galactosidase, ki ka dekonpoze laktoz nan galaktoz ak glikoz. Efè sa a ka ankouraje dekonpozisyon ak metabolis sik, kidonk bay enèji. Anplis de sa, IPTG kapab afekte tou sentèz ak metabolis sik. Nan eksperyans kristalizasyon pwoteyin, IPTG ka itilize kòm yon derive ki pa natirèl asid amine pou patisipe nan pwosesis sentèz pwoteyin.
Dezyèmman, IPTG ka afekte metabolis grès. Grès se youn nan sibstans enèji ki enpòtan nan selil yo, epi dekonpozisyon ak sentèz li yo enpòtan anpil pou siviv ak fonksyon selil yo. Nan kèk ka, IPTG ka pwovoke aktivite anzim lipolitik, kidonk ankouraje katabolis grès. Anplis de sa, IPTG kapab tou afekte sentèz ak metabolis asid gra, kidonk afekte kwasans selil ak diferansyasyon.
Finalman, IPTG ka afekte metabolis pwoteyin. Nan eksperyans kristalizasyon pwoteyin, IPTG ka itilize kòm yon derive ki pa natirèl asid amine pou patisipe nan pwosesis sentèz pwoteyin. Anplis de sa, IPTG kapab tou afekte katabolism pwoteyin, kidonk kontwole kwasans selil ak diferansyasyon.
5. Lòt pwopriyete reyaksyon:
Anplis de pwopriyete reyaksyon ki anwo yo, IPTG ka patisipe tou nan kèk lòt reyaksyon chimik. Pou egzanp, IPTG ka sibi reyaksyon echanj ester ak lòt konpoze pou fòme nouvo konpoze. Pwopriyete reyaksyon sa yo ka aplike nan konsepsyon eksperimantal espesifik.