Retatrutide(lyen:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/retatrutide-powder-cas-2381089-83-2.html) se yon agonist polipèptid GLP-1R/GIPR/GCGR ki se sentetize chimik ki dire lontan, ki fèt pou tretman dyabèt tip 2 granmoun, jesyon pwa ak fwa gra ki pa alkòl/steatoepatit ki pa alkòl. Endikasyon pou adilt tip 2 dyabèt pwodui sa a te apwouve pou itilizasyon klinik nan dat 29 out 2023. Anplis de sa, aplikasyon an pou anrejistreman klinik endikasyon pou fwa gra ki pa alkòl/steatoepatit san alkòl se nan etap final revizyon an. Gen uit GLP-1R/GIPR/GCGR agonist ki sou devlopman nan mond lan, ki, Retatrutide Rita a te fè pwogrè ki pi rapid e li te lanse twazyèm faz esè klinik la nan mwa jen ane sa a. Nan menm mwa a, Rita te anonse ke done rechèch dezyèm faz retatrutide te pibliye nan reyinyon anyèl ADA a, ki montre ke nan 24 semèn, retatrutide (1 mg, 4 mg, 8 mg oswa 12 mg) te rive nan pwen final prensipal la nan efikasite. evalyasyon pou patisipan obèz oswa ki twò gwo san dyabèt, ak yon pèt pwa mwayèn nan 17.5%. Pami pwen final segondè yo, yo te reyalize yon pèt pwa mwayèn nan 24.2% nan fen semèn 48 nan tretman an. Nou te tou sentèz peptide a nan laboratwa a ki baze sou metòd la pibliye. Metòd sentèz espesifik yo pral dekri yon ti tan, epi etap espesifik yo ka voye ba nou pa imel.
Metòd 1:
Etap detaye pou sentèz Retarutide lè l sèvi avèk sentèz eta solid nan laboratwa a se jan sa a:
Prepare reyaktif ak enstriman ki nesesè yo: ki gen ladan asid amine, diklorometan, kabonat potasyòm, jèl silica etoxylated, asetonitrile, piridin, N-methylmorpholine, sous klori diisopropylethyl, asid trifluoroacetic, DIPEA, asid amine ki pwoteje Boc ak lòt reyaktif, osi byen ke agitateur. , evaporateur rotary ak lòt enstriman.
(1) Sentèz asid amine ki pwoteje Boc: Fonn asid amine ki nesesè yo nan dichloromethane, ajoute poud kabonat potasyòm, brase respire, ajoute jèl silica etoksilate, kontinye brase, epi ajoute piridin ak N-methylmorpholine pou jwenn asid amine ki pwoteje Boc.
(2) Sentèz faz solid: Melanje asetonitrile, sous klori diisopropylethyl, ak asid trifluoroacetic ansanm, brase respire, ajoute asid amine ki pwoteje Boc, epi kontinye brase pou jwenn pwodwi sentèz faz solid la.
(3) Gwoup depwoteksyon: Fonn sentèz faz solid la nan dichloromethane, ajoute asid trifluoroacetic, brase respire, epi ajoute DIPEA. Kontinye brase pou jwenn sentèz faz solid depwoteksyon an.
(4) Pirifikasyon: Fonn sentèz faz solid depwoteksyon an nan dlo, ajiste pH la nan alantou 9.0 ak solisyon idroksid sodyòm, Lè sa a, ajiste pH la nan alantou 5.0 ak asid acetic, epi finalman presipite pwodwi a pi ak etè.
Metòd 2:
Etap detaye pou sentèz Retarutide lè l sèvi avèk sentèz faz likid nan laboratwa a se jan sa a:
Prepare reyaktif ak enstriman ki nesesè yo: ki gen ladan arjinin, glisin, anidrid acetic, triethylamine, kabonat potasyòm, dichloromethane, metanol, piridin, N-methylmorpholine, anhydride acetic, acetate sodyòm, ak lòt reyaktif, osi byen ke enstriman tankou brase, antonwa separasyon. ponp vakyòm, fou, ak kolòn kwomatografik.
(1) Fonn arjinin ak glisin nan yon kantite ki apwopriye nan dichloromethane, ajoute yon kantite apwopriye nan anhydride acetic ak triethylamine, epi brase respire anba yon brase.
(2) Transfere melanj ki fonn nan yon fou epi chofe li nan 80 degre C pou 1 èdtan pou asetilate résidus asid amine yo.
(3) Netralize solisyon an reyaji ak poud kabonat potasyòm pou netralize asid acetic nan solisyon an pou jenere acetate sodyòm, ak Lè sa a, ekstrè peptide pwodwi a ak dichloromethane.
(4) Lave solisyon peptide ekstrè a ak metanol epi filtre ak yon ponp vakyòm pou jwenn peptide brit la.
(5) Fonn peptide brit la nan yon kantite apwopriye piridin ak N-methylmorpholine, ajoute yon kantite apwopriye nan anhydride acetic ak acetate sodyòm, epi brase respire anba yon brase.
(5) Filtre solisyon an reyaji ak yon ponp vakyòm, lave gato filtre a ak metanol, ak Lè sa a, filtre ak yon ponp vakyòm pou jwenn Restarutide final la.
Metòd 3:
Etap detaye pou sentèz Retarutide lè l sèvi avèk metòd chimik nan laboratwa a se jan sa a:
Prepare reyaktif ak enstriman ki nesesè yo: ki gen ladan arjinin, glisin, anidrid acetic, triethylamine, kabonat potasyòm, dichloromethane, metanol, piridin, N-methylmorpholine, anhydride acetic, acetate sodyòm, ak lòt reyaktif, osi byen ke enstriman tankou brase, antonwa separasyon. ponp vakyòm, fou, ak kolòn kwomatografik.
(1) Fonn arjinin ak glisin nan yon kantite ki apwopriye nan dichloromethane, ajoute yon kantite apwopriye nan anhydride acetic ak triethylamine, epi brase respire anba yon brase.
(2) Transfere melanj ki fonn nan yon fou epi chofe li nan 80 degre C pou 1 èdtan pou asetilate résidus asid amine yo.
(3) Netralize solisyon an reyaji ak poud kabonat potasyòm pou netralize asid acetic nan solisyon an pou jenere acetate sodyòm, ak Lè sa a, ekstrè peptide pwodwi a ak dichloromethane.
(4) Lave solisyon peptide ekstrè a ak metanol epi filtre ak yon ponp vakyòm pou jwenn peptide brit la.
(5) Fonn peptide brit la nan yon kantite apwopriye piridin ak N-methylmorpholine, ajoute yon kantite apwopriye nan anhydride acetic ak acetate sodyòm, epi brase respire anba yon brase.
(6) Filtre solisyon an reyaji ak yon ponp vakyòm, lave gato filtre a ak metanol, ak Lè sa a, filtre ak yon ponp vakyòm pou jwenn Restarutide final la.
Plizyè reyaksyon sentèz òganik yo oblije jwenn molekil sib la. Anplis de sa, metòd sa a sèvi ak plizyè reyaktif òganik ak kondisyon operasyon konplèks, kidonk sentèz chimik Rotarutide nan laboratwa a anjeneral pa apwopriye pou pwodiksyon gwo echèl oswa aplikasyon endistriyèl. Pou pwodiksyon gwo echèl oswa aplikasyon endistriyèl, metòd ki pi souvan itilize se prepare Rotarutide atravè metòd sentèz tankou byosentèz oswa sentèz faz likid, ki relativman ti nan echèl laboratwa, relativman senp nan operasyon, ak apwopriye pou prepare ti kantite pwodwi. . Retarutide a jwenn pa metòd sa yo se menm jan an oswa menm jan an nan estrikti ak aktivite byolojik ak Retarutide la sentèz pa metòd chimik, men li gen avantaj ki genyen nan pi wo sede ak pi fasil preparasyon. An menm tan an, yo gen tou pi bon potansyèl endistriyalizasyon ak kandida aplikasyon pi laj.
Metòd 4:
Etap detaye pou sentèz Retarutide lè l sèvi avèk metòd byolojik nan laboratwa a se jan sa a:
Preparasyon jèn ak reyaktif ki nesesè yo: Jwenn plasmid ki gen jèn Retatrutide nan bibliyotèk jèn yo, transfòme plasmid yo ak selil resevwa (tankou Escherichia coli), epi jwenn bakteri jeni ki gen jèn Retatrutide la.
(1) Kiltive bakteri jeni: Anba tanperati apwopriye, pH, ak kondisyon konsantrasyon ion, sèvi ak yon mwayen kilti pou kiltive bakteri jeni, ki pèmèt yo pwopagasyon an gwo kantite.
(2) Ekstraksyon Retarutide: Bakteri jeni kiltive yo kraze lè l sèvi avèk yon ékrazan, epi fragman selil yo separe ak Retarutide lè l sèvi avèk metòd tankou ultrafiltrasyon ak sedimantasyon pou jwenn pwodwi brit la.
(3) Pirifikasyon nan Retarutide: Retarutide brit la pirifye lè l sèvi avèk teknoloji kwomatografi pou jwenn Retarutide pite segondè.
Deteksyon ak idantifikasyon Rotarutide: Sèvi ak segondè-pèfòmans likid chromatografi, espektrometri mas, sonorite nikleyè mayetik, ak lòt teknik pou detekte ak idantifye estrikti Rotarutide pirifye a.
Ekwasyon reyaksyon chimik pou sentèz byolojik Retarutide nan laboratwa a sitou enplike nan reyaksyon chimik pandan pwosesis ekspresyon jèn, ki gen ladan de etap: transkripsyon ak tradiksyon.
Transkripsyon: ADN doub stranded ouvè, lè l sèvi avèk yon sèl fil kòm yon modèl pou fè sentèz RNA fil, ki mande pou patisipasyon nan RNA polymerase. Ekwasyon reyaksyon an se jan sa a:
ADN doub bloke: DNApol → mRNA + DNApol
Tradiksyon: Ribosomes mare nan mRNA pou fè sentèz chèn peptide, yon pwosesis ki mande patisipasyon asid amine ak enèji. Ekwasyon reyaksyon an se jan sa a:
Ribosome+mRNA → Chèn peptide+GDP+Pi+H2O
Chèn peptide+ATP → Chèn peptide+AMP+PPi
Pami yo, DNApol reprezante DNA polymerase; MRNA reprezante RNA mesaje; Ribosomes reprezante ribosomes; Chenn peptide reprezante chenn polipeptid; GDP reprezante guanosine difosfat; Pi reprezante asid fosfò inòganik; H2O reprezante dlo; ATP reprezante adenozin trifosfat; AMP reprezante adenozin monofosfat; PPi reprezante pirofosfat inòganik. Reyaksyon sa yo jenere chèn peptide ki nesesè pou sentèz Retarutide, ki answit trete ak modifye nan etap pita yo pou jwenn Retarutide.
Pi wo a se metòd komen pou sentèz Rotarutide nan laboratwa a, yo chak ak diferan avantaj, dezavantaj, ak dimansyon itilizasyon. Laboratwa a anjeneral itilize sentèz faz likid ak metòd sentèz faz solid pou pwodiksyon ti-echèl pou rechèch ak itilizasyon eksperimantal; Pwodiksyon endistriyèl, nan lòt men an, adopte yon konbinezon de byosentèz ak pwodiksyon likid / solid faz pou pwodiksyon gwo echèl satisfè demann mache. Li ta dwe remake ke metòd sa yo mande pou optimize kondisyon strik ak kontwòl pwosesis asire bon jan kalite a ak pite nan pwodwi final la.