Iptg poudka itilize pou sit aksyon anestezi lokal la, li aplike kòm yon ajan gaye pou soulajman doulè blesi apre operasyon ak doulè ilsè. Molekilè reyaktif byolojik yo souvan itilize nan tès depistaj tach ble ak blan ak IPTG pwovoke ekspresyon pwoteyin nan bakteri. IPTG, non konplè isopropyl- - D-thiogalactoside, CAS 367-93-1, fòmil molekilè C9H18O5S, pwa molekilè 384.37 Daltons, ki fè pati ti molekil konpoze. Poud blan oswa prèske blan, ak solubilite ki ba nan dlo men pi bon solubilite nan Solvang òganik. Gen gwoup iyonik nan molekil yo, kidonk yo gen yon sèten degre konduktiviti nan dlo. Ki estab nan tanperati chanm, men fasil dekonpoze anba tanperati ki wo oswa asid fò ak kondisyon alkali. Pa gen okenn odè evidan, men yon ti odè konpoze òganik ka emèt pandan w ap itilize. Li se yon pwodiktè souvan itilize pou pwovoke ekspresyon pwoteyin nan bakteri. Nan dyagnostik medikal, IPTG ka sèvi kòm yon pwofonde fliyoresan oswa ajan chromogenic pou detekte molekil espesifik oswa tisi nan echantiyon yo. Lè yo konbine avèk molekil sib, IPTG ka jenere siyal fliyoresan oswa chanjman koulè, bay sipò solid pou dyagnostik maladi.

|
Mòfolojik |
Crystalline poud |
|
Koulè |
Blan |
|
Pwen k ap fonn |
105 degre C |
|
Pwen bouyi |
350.9 degre C (estimasyon ki graj) |
|
Dansite |
1.3329 (estimasyon ki graj) |
|
Kondisyon depo |
2-8 degre C |
|
solubilite alkòl |
solublesoluble 40 pati nan sòlvan |
|
Koyefisyan asidite (pKa) |
13.00 ± 0.70 (Prevwa) |
|
Soluble nan dlo |
50 mg / ml |
|
Flash pwen |
197.8 degre |
|
Solibilite |
1.6g/l |
|
Dansite vapè |
5.21 (kont lè) |
|
Endèks refraktif |
1.5060 (estimasyon) |
|
|
|
Iptg poud,Paramèt fizik , Mp. : 114 ~ 121 degre C, deskripsyon itilizasyon, reyaktif byoloji molekilè komen, souvan itilize nan tès depistaj ble -blan ak IPTG-pwovoke ekspresyon pwoteyin nan bakteri. , Espesifikasyon anbalaj , 1G, 5G, 25G, 100G, 1KG , Kondisyon depo
2-8 degre nan frijidè, pwoteje kont limyè, deskripsyon danje, kòd danje: Xi, nivo risk: R36 / 37 / 38, nivo sekirite: S23-24 / 25-36.
IPTG yo souvan itilize nan eksperyans klonaj ki bezwen pwovoke aktivite galaktozidaz. Li souvan itilize nan konbinezon ak X-Gal oswa Bluo-Gal pou tès depistaj ble-blan nan koloni bakteri recombinant, ki ka pwovoke pa Chemicalbook pou eksprime lak operon nan E. coli. IPTG mare ak pwoteyin represeur lacI epi chanje konfòmasyon li pou anpeche jèn lacZ kode pa -galactosidase.

IPTG, non konplè isopropyl- -D-thiogalactoside se yon pwodiktè souvan itilize lajman ki itilize pou pwovoke ak reglemante ekspresyon pwoteyin. Akòz estrikti inik li yo ak fonksyon, IPTG anjeneral prepare lè l sèvi avèkIptg poudmetòd sentèz nan laboratwa a.
Wout sentetik
1. sentèz glikozid:
Premye sentèz -D{-tiogalaktozid anjeneral sentèz pa metòd sentèz glikozid, nan kondansasyon galaktoz ak baz korespondan (tankou izopropil). Etap sa a mande pou yo sèvi ak gwoup pwoteksyon pou evite jenerasyon by-pwodwi nan reyaksyon ki vin apre yo.
2. Reyaksyon fosforilasyon:
Sou baz sentèz glikozid, gwoup fosfat yo prezante atravè reyaksyon fosforilasyon pou jwenn gwoup izopropil - -D-thiogalactoside-5'-fosfat ester. Etap sa a mande pou itilize fosfat ak anidrid korespondan oswa asid.
3. Gwoup depwoteksyon:
Pa reyaksyon gwoup depwoteksyon, gwoup pwoteksyon nan glikozid la retire pou jwenn pwodwi sib isopropyl- - D-thiogalactoside. Etap sa a mande pou itilize yon solisyon asid oswa alkali pou fasilite reyaksyon an.

Etap eksperimantal:
Prepare reyaktif ak enstriman:
Prepare sik ki nesesè yo, baz, gwoup pwoteksyon, fosfat, anidrid oswa asid, solvang, ak lòt reyaktif, osi byen ke enstriman eksperimantal ki nesesè tankou agitateur, tèmomèt, espektrofotomèt, elatriye.
Sentèz glikozid:
Chofe ak brase galaktoz ak baz korespondan nan yon sòlvan, ajoute yon katalis, epi ankouraje reyaksyon kondansasyon an. Etap sa a mande pou kontwòl strik nan tanperati ak tan brase asire pwogrè nan lis nan reyaksyon an.
Reyaksyon fosforilasyon:
Glikozid sentèz yo chofe ak brase ak fosfat, anidrid oswa asid nan yon sòlvan, epi yo ajoute yon katalis pou ankouraje reyaksyon fosforilasyon an. Etap sa a mande pou kontwole tanperati a ak tan brase, pandan y ap peye atansyon sou polarite a ak dòz sòlvan an asire pwogrè nan reyaksyon an ak jenerasyon an nan pwodwi a.
Gwoup depwoteksyon:
Retire gwoup pwoteksyon an nan pwodwi fosforilasyon an nan yon solisyon asid oswa alkali pou jwenn pwodwi sib isopropyl- - D-thiogalactoside. Etap sa a mande pou kontwole valè pH ak tanperati a, pandan w ap peye atansyon sou polarite ak dòz sòlvan an pou asire pwogrè reyaksyon an ak jenerasyon pwodwi a.
Separasyon ak pirifikasyon:
Pwodui sib la separe de melanj reyaksyon an atravè kolòn kwomatografi, rkristalizasyon, ak lòt metòd separasyon ak pirifikasyon. Etap sa a mande pou atansyon a kondisyon fonksyònman tankou tanperati, dòz sòlvan, pousantaj koule, elatriye asire pite a ak sede nan pwodwi a.
Analiz ak idantifikasyon:
Idantifikasyon estriktirèl pwodwi sib la te pote soti nan metòd analyse tankou sonorite nikleyè mayetik ak espektrometri mas. Etap sa a mande pou itilize enstriman korespondan, ekipman, ak mwayen teknik pou konfime estrikti ak pite pwodwi a.

Iptg poudnon konplè isopropyl- - D-thiogalactoside se yon pwodiktè souvan itilize lajman ki itilize pou pwovoke ak kontwole ekspresyon pwoteyin.
1. Pwoteyin ekspresyon endiksyon:
IPTG jwe yon wòl enpòtan nan endiksyon ekspresyon pwoteyin. Li se yon pwodiktè lajman itilize ki ka efikasman pwovoke ekspresyon jèn espesifik nan bakteri, kidonk jwenn pwoteyin sib vle a nan yon kout peryòd de tan. Mekanis aksyon li yo se mare nan jèn lacI nan bakteri, anpeche aktivite a nan pwoteyin transkripsyon regilasyon li yo, kidonk louvri operon lac nan bakteri ak kòmanse ekspresyon jèn sib yo. Lè w ap itilize operon laktoz kòm pwomotè pou ekspresyon pwoteyin, pwodiktè yo obligatwa, epi IPTG ka aji kòm yon analogue laktoz pou pwovoke ekspresyon galactosidase nan Escherichia coli. Li pa ka itilize pa selil yo pou reyalize ekspresyon soutni. IPTG mare nan lac|pwodwi yo, sa ki lakòz chanjman konformasyon lwen lacO, kidonk aktive transcription. Règleman transkripsyon inductible sa a vin yon eleman souvan itilize nan konstriksyon vektè sistèm ekspresyon E. coli.
2. Règleman ekspresyon jèn:
IPTG jwe yon wòl enpòtan nan règleman ekspresyon jèn yo. Kòm yon reyaktif eksperimantal enpòtan, li jwe yon wòl enpòtan nan règleman ekspresyon jèn ak eksperyans ekspresyon pwoteyin. Lè yo kontwole tan an adisyon ak konsantrasyon nan IPTG, règleman nan ekspresyon pwoteyin sib ka reyalize. Efè regilasyon sa a baze sou obligatwa IPTG ak lac|pwodwi nan operon laktoz, chanje konfòmasyon yo, kidonk kite lacO ak plis aktive transcription. Mekanis regilasyon transkripsyon inductible sa a fè IPTG yon gwo siyifikasyon nan domèn rechèch tankou fonksyon jèn, entèraksyon pwoteyin, ak tès depistaj dwòg.
3. Pwoteyin kristalizasyon:
Nan eksperyans kristalizasyon pwoteyin, IPTG yo itilize kòm yon pwodiktè pou ankouraje kristalizasyon pwoteyin. Mekanis aksyon li yo se chanje konfòmasyon nan pwoteyin pa obligatwa nan rejyon idrofob nan pwoteyin, kidonk ankouraje agrégation ak kristalizasyon ant molekil pwoteyin. Pwosesis rasanbleman ak kristalizasyon sa a revèsib, kidonk kristalizasyon pwoteyin ka pwovoke lè w ajoute IPTG, oswa kristal pwoteyin yo ka fonn lè w retire IPTG.
Nan eksperyans kristalizasyon pwoteyin, IPTG anjeneral ajoute nan solisyon an pwoteyin kòm konsantrasyon final la nan 1mM. Sa a konsantrasyon ki ba nan IPTG ka evite twòp endiksyon nan pwoteyin, kidonk reyalize pi bon efè kristalizasyon. An menm tan an, IPTG ka sèvi tou kòm yon chaperone molekilè pou ede nan plisman kòrèk la ak agrégation nan pwoteyin, kidonk jwenn plis kristal pwoteyin inifòm.
Li ta dwe remake ke IPTG pa ankouraje kristalizasyon pwoteyin nan tout ka yo. Gen kèk pwoteyin ki pa sansib a IPTG, oswa akòz estrikti nannan yo ak pwopriyete ki pa apwopriye pou kristalizasyon, validation eksperimantal ak optimize yo bezwen pou diferan pwoteyin detèmine kondisyon yo kristalizasyon optimal ak metòd.
Reyaksyon negatif
Sitotoksisite

Toksisite nan selil prokaryotik
Malgre ke IPTG yo souvan itilize pou pwovoke ekspresyon jèn nan selil prokaryotik, gwo konsantrasyon IPTG ka gen efè toksik sou selil prokaryotik. Rechèch yo montre ke lè konsantrasyon IPTG twò wo, li ka entèfere ak pwosesis metabolik nòmal nan selil yo. Pou egzanp, li ka afekte metabolis enèji nan selil yo, entèfere ak chemen tankou glikoliz ak sik asid tricarboxylic, ki mennen nan yon diminisyon nan pwodiksyon ATP intraselilè ak afekte kwasans selil ak pwopagasyon. Anplis de sa, gwo konsantrasyon IPTG ka tou domaje entegrite manbràn selilè a, ogmante pèmeyabilite li yo, mennen nan flit nan sibstans entraselilè, epi pèmèt sibstans danjere nan anviwònman an ekstraselilè antre nan selil la, kidonk sa ki lakòz lanmò selil. Eksperyans yo te jwenn ke lè Escherichia coli kiltive nan yon mwayen ki gen gwo konsantrasyon nan IPTG, to kwasans lan nan bakteri yo siyifikativman ralanti ak kantite bakteri solid piti piti diminye ak ekstansyon an nan tan kiltivasyon. Sa a endike ke gwo konsantrasyon IPTG gen yon sèten efè inhibition ak touye sou Escherichia coli.
Toksisite nan selil ekaryotik
Anplis selil prokaryotik, IPTG ka toksik tou pou selil ekaryotik. Gen sèten diferans nan estrikti ak fonksyon ant selil ekaryotik ak selil prokaryotik, men IPTG ka toujou afekte fonksyon nòmal fizyolojik selil ekaryotik atravè divès chemen. Sou yon bò, IPTG ka entèfere ak chemen transdiksyon siyal nan selil ekaryotik yo. Transdiksyon siyal la nan selil yo jwe yon wòl regilasyon enpòtan nan pwosesis tankou kwasans, diferansyasyon, ak apoptoz. IPTG ka chanje entansite ak direksyon transdiksyon siyal lè li kominike avèk sèten molekil siyal nan selil yo, kidonk afekte aktivite nòmal fizyolojik selil yo.


Toksisite nan selil ekaryotik
Nan lòt men an, IPTG ka pwovoke repons estrès oksidatif nan selil ekaryotik. Estrès oksidatif refere a yon move balans ant oksidasyon entraselilè ak aktivite antioksidan, ki mennen nan yon ogmantasyon nan pwodiksyon espès oksijèn reyaktif (ROS). Twòp ROS ka atake biomolekil tankou ADN, pwoteyin, ak lipid nan selil la, sa ki lakòz domaj selilè ak andikap fonksyonèl. Rechèch te jwenn ke nan sèten kondisyon, tretman IPTG nan selil ekaryotik ogmante siyifikativman nivo ROS intraselilè, akonpaye pa yon diminisyon nan viabilite selil ak yon ogmantasyon nan pousantaj apoptoz. Sa a sijere ke IPTG ka pwovoke repons estrès oksidatif ak fè egzèsis toksisite sou selil ekaryotik.
Baj popilè: iptg poud cas 367-93-1, Swèd, manifaktirè, faktori, wholesale, achte, pri, esansyèl, pou vann




