Agarose poudse yon sibstans òganik ak fòmil chimik c24h38o19. Li se yon pèl blan oswa jòn tankou patikil jèl oswa poud, ki se yon polymère lineyè, ak estrikti debaz la se 1,3 lye - D{-galaktoz ak 1,4-lye 3,6-endoether-l-galaktoz yo altènativman lye.
Agar pèktin se yon melanj eterojèn ki konpoze de anpil molekil ki pi piti. Agarose jeneralman chofe pi wo pase 90 degre pou fonn nan dlo, epi lè tanperati a desann nan 35 -40 degre, li fòme yon bon jèl semi-solid, ki se karakteristik prensipal la ak baz divès kalite itilizasyon li yo. Pèfòmans jèl agarose anjeneral eksprime pa fòs jèl la. Plis fòs la pi wo, se pi bon pèfòmans jèl la.
Agarose Powder, abreje kòm Ag, se yon eleman net ki pa chaje nan agar, ki tradui tou kòm agarose oswa agarose. Estrikti chimik agaroz relye pa 1,3 - D-galaktoz ak 1,4-lye 3,6-endoether-l-galaktoz yo altènativman lye.
Agarose se sòti nan polisakarid alg wouj, ak eleman prensipal li se poligalaktoz, ki apeprè 70% se agarose ak 30% se agaroz chèn branch. Agarose gen yon estrikti lineyè epi li pase D-galaktoz ak 3,6-galaktoz dezidrate - 1, 4 ak - 1, 3 jonksyon altènativman fòme inite disakarid ki repete. Agarose chenn branch yo te extrait nan - 1, 3 lyezon separe yon lòt chèn. Materyèl la ekstrè nan alg ak dlo cho gen apeprè 40% agar. Agar ki disponib nan komèsyal (ki souvan rele agar) se souvan nan fòm fèy oswa kòd ki lach epi li anjeneral itilize kòm jansiv manjab, ajan anbalaj dwòg oswa mwayen kilti bakteri. Agarose pi souvan itilize nan laboratwa byochimik kòm yon sipò semi-solid nan elektwoforèz, kromatografi ak lòt teknoloji pou separasyon ak analiz de makromolekil byolojik oswa ti molekil.
Pwosesis pwodiksyon Agarose ka divize an kat pati: pretreatment, ekstraksyon, tretman seluloz DEAE ak dezidratasyon.
1) Matyè premyè poud pretrete yo dirèkteman seche nan 80C pou 1/2 h. teren an ak blòk matyè premyè yo lave ak dlo, koupe an ti moso, ak kwit nan fou
2) Ekstraksyon: apre brase ak ekstrè ak asid acetic sodyòm acetate melanje ester solisyon pou plizyè èdtan, retire dlo pa aspirasyon, lave, Lè sa a, brase ak ekstrè ak kabonat sodyòm sodyòm bikabonat tanpon solisyon pou plizyè èdtan, ak Lè sa a, ponpe, filtre epi lave ak dlo.
3) Jèl agar ki ekstrè pa solisyon tanpon an fonn nan solisyon 4% pa chofe ak dlo, ak Lè sa a, ajoute ak DEAE seluloz pou brase pou 3-4 èdtan anba prezèvasyon chalè, ak Lè sa a, santrifuje. Se filtraj la kolekte epi filtre pou jwenn yon solisyon blan nan eta koloidal
4) Dezidratasyon: apre yo fin chofe filtraj blan an, ajoute 95% etanòl rapidman pandan y ap brase jiskaske pa gen okenn presipitasyon evidan, fre li nan tanperati chanm, vide solisyon an kouch anwo a, lave epi sèk presipite a pou jwenn pwodwi a, ak yon sede 71%.
Rekiperasyon reyaktif DEAE rekiperasyon seluloz: apre santrifujasyon, presipite a bouyi ak dlo, filtre sou twal swa 100 may, repete plizyè fwa jiskaske filtraj la klè, Lè sa a, lave ak 0.5mol / 1 HCI, 0.5mol / 1 NaOH ak dlo, epi seche. Pousantaj rekiperasyon an se 95% Fraksyon 80 C a te kolekte pa distilasyon dirèk nan solisyon akeuz etanolik refè nan solisyon akeuz Yichun Lè sa a, ajoute klori sodyòm solid nan saturation epi kontinye distile . 70% ka chaje. Apre klori sodyòm nan boutèy la evapore, li kapab tou chaje pa valv.
Agarose Powderse yon polisakarid ki soti nan alg epi li se eleman prensipal nan agar. Depi dekouvèt li yo, li te lajman itilize nan anpil jaden akòz pwopriyete inik fizik ak chimik li yo, tankou kapasite jèl fòme, estabilite tèmik, estabilite chimik ak biocompatibility. Sa ki anba la a se yon eksplikasyon detaye sou objektif li:
Elektwoforèz jèl Agarose se youn nan teknik separasyon ak analiz ki pi souvan itilize nan byoloji molekilè. Kòm mwayen elektwoforèz jèl, agarose gen avantaj ki genyen nan gwosè gwo pò, ranje separasyon lajè ak operasyon senp. Nan pwosesis elektwoforèz, makromolekil byolojik tankou ADN, RNA oswa pwoteyin imigre nan porositë jèl agaroz anba aksyon jaden elektrik. Akòz diferans ki genyen nan chaj, gwosè ak fòm nan molekil diferan, vitès migrasyon yo nan jèl diferan, kidonk reyalize separasyon. Elektwoforèz jèl Agarose se lajman ki itilize nan klonaj jèn, analiz ekspresyon jèn ak deteksyon mitasyon jèn. Li se souvan itilize kòm yon sipò oswa matris nan kilti selil. Akòz ekselan biocompatibility li yo ak estabilite chimik, agarose ka bay yon anviwònman kwasans ki estab pou selil yo. Pou egzanp, nan eksperyans fòmasyon koloni agar mou, yo itilize agarose pou prepare mwayen kilti semi-solid pou detekte kapasite fòmasyon koloni selil yo, ki se yon gwo siyifikasyon pou evalye degre transfòmasyon malfezan selil yo.
Anplis de sa, agarose kapab tou konbine avèk lòt biomateryèl pou prepare materyèl echafodaj konpoze pou itilize nan jeni tisi ak medikaman rejeneratif. Agarose jèl tou jwe yon wòl enpòtan nan imunodifizyon ak imunoelektroforèz. Nan teknoloji sa yo, jèl agarose, kòm mwayen reyaksyon antijèn ak antikò, ka fòme liy presipitasyon klè oswa bag, ki ka itilize pou detekte ak analize prezans ak konsantrasyon antijèn oswa antikò. Gwosè pò a ak pwopriyete chaj nan jèl agarose ka afekte to difizyon an ak efikasite obligatwa nan antijèn ak antikò, kidonk kondisyon eksperimantal yo ka optimize pa ajiste konsantrasyon an ak kalite agaroz.
Aplikasyon nan Eksperyans Biyoloji Molekilè
Elektwoforèz jèl Agarose pa sèlman ka itilize pou separe ADN ak RNA, men tou, konbine avèk lòt teknoloji pou reyalize pirifikasyon yo. Pou egzanp, nan pwosesis la nan ekstraksyon ADN, elektwoforèz jèl agarose ka itilize pou detekte entegrite ak pite ADN, ak Lè sa a, segman ADN sib la ka separe de jèl la pa koupe jèl ak rekiperasyon. Metòd sa a gen avantaj ki genyen nan operasyon fasil ak pousantaj rekiperasyon segondè. Nan eksperyans ibridasyon asid nikleyè, yo ka itilize jèl agaroz kòm yon sipò faz solid pou ranje sond ADN oswa RNA sou jèl la, ak Lè sa a, ibrid ak asid nikleyik sib ki make. Lè w detekte prezans ak entansite siyal ibridizasyon yo, yo ka detèmine prezans ak konsantrasyon asid nikleyik sib yo.
Gwosè pò a ak pwopriyete chaj nan jèl agarose ka afekte efikasite nan obligatwa nan pwofonde ak sib asid nikleyik, kidonk kondisyon yo ibridizasyon ka optimize pa ajiste konsantrasyon an ak kalite agaroz. Reyaksyon chèn polymerase (PCR) se youn nan teknik ki pi souvan itilize nan byoloji molekilè pou anplifye ADN. Nan analiz de pwodwi PCR, elektwoforèz jèl agarose se youn nan metòd ki pi souvan itilize yo. Lè yo separe pwodwi PCR atravè elektwoforèz, yo ka detekte gwosè ak pite fragman anplifye yo, kidonk detèmine si reyaksyon PCR la reyisi epi si gen pwoblèm anplifikasyon ki pa-espesifik.
Malgre ke gwosè pò a nan jèl agarose se relativman gwo, li pa apwopriye pou separe ti pwoteyin molekilè, men li ka toujou itilize pou separasyon pwoteyin ak pirifikasyon nan kèk ka. Pou egzanp, nan elektwoforèz jèl preparasyon, yo ka itilize jèl agarose pou separe ak pirifye pwoteyin ki gen pi gwo pwa molekilè. Anplis de sa, agarose kapab tou konbine avèk lòt materyèl pou prepare jèl konpoze pou elaji seri separasyon li yo ak amelyore efikasite separasyon an. Nan kèk eksperyans detèminasyon aktivite anzim, jèl agarose ka itilize kòm yon konpayi asirans pou imobilizasyon anzim. Imobilizasyon anzim la sou jèl agaroz ka kenbe aktivite ak estabilite anzim la epi fasilite separasyon ak rekiperasyon anzim nan reyaktif yo. Metòd sa a gen aplikasyon lajè nan jaden an nan jeni anzim.
Aplikasyon nan mikrobyoloji
Agarose se souvan itilize kòm yon koagulan nan medya kilti mikwòb. Konpare ak agar, agarose gen pi wo pite ak pi ba kontni enpurte, fè li pi apwopriye pou kiltivasyon mikwòb. Lè w ap prepare mwayen kilti solid, fonn agarose nan dlo cho, Lè sa a, ajoute lòt eleman nitritif ak antibyotik, epi fre yo fòme mwayen kilti solid. Sa a kalite mwayen kilti ka bay yon anviwònman kwasans ki estab pou mikwo-òganis, fasilite izolasyon yo, pirifikasyon, ak idantifikasyon. Nan eksperyans idantifikasyon mikrobyolojik, yo ka itilize jèl agarose pou prepare medya idantifikasyon espesifik. Pou egzanp, lè yo idantifye bakteri entesten yo, yo ka itilize mwayen kilti agaroz ki gen sik espesifik pou distenge diferan kalite bakteri lè yo obsève fèmantasyon sik yo. Anplis de sa, jèl agarose ka itilize tou pou prepare medya reyaksyon byochimik pou mikwo-òganis yo detekte karakteristik metabolik yo ak aktivite anzim yo.
Agarose Powderse jeneralman chofe pi wo a 90 degre pou fonn nan dlo, epi lè tanperati a desann nan 35 -40 degre, li fòme yon bon jèl semi-solid, ki se karakteristik prensipal la ak baz divès kalite itilizasyon li yo. Pèfòmans jèl agarose anjeneral eksprime pa fòs jèl la. Plis fòs la pi wo, se pi bon pèfòmans jèl la. Se jèl la nan agarose ki te koze pa egzistans la nan lyezon idwojèn. Nenpòt faktè ki ka detwi lyezon idwojèn yo ka mennen nan destriksyon jèl. Agarose se idrofil ak prèske konplètman gratis nan gwoup chaje. Li raman lakòz denaturasyon ak adsorption nan makromolekil byolojik sansib. Li se yon konpayi asirans ideyal inaktif. Nan pwosesis la nan preparasyon agarose, li nesesè yo retire pèktin nan agar otank posib, otreman ka gen yon ti kantite silfat ak asid piruvik ranplase gwoup la ionize nan agarose, ki pral lakòz elektwoosmoz (EEO) ak afekte mouvman an nan patikil. Kontni silfat nan agarose ak bon kalite relativman ba, anjeneral anba a 0.2%, ak elektwoosmoz la se relativman ti, anjeneral anba a 0.13. Se poutèt sa agarose tèlman chè pase agar.
Nan 1937, Araki separe agarose ak agar pou premye fwa, men li pa t 'jouk 1961 ke hjertin premye dekouvri pèfòmans nan ekselan nan agarose ke li atire pi plis ak plis atansyon epi li te kòmanse pwodiksyon endistriyèl. Agarose se lajman ki itilize nan tès klinik, analiz byochimik ak separasyon biomacromolecules.
Agarose poud se yon zouti fondamantal nan byoloji molekilè ak byoteknoloji, ak yon pakèt aplikasyon nan elektwoforèz jèl, kromatografi afinite, imunodifizyon, ak imunoelektwoforèz. Pwopriyete inik li yo, tankou fasilite pou itilize, adaptabilite, toksisite ki ba, ak pri -efikasite, fè li yon eleman endispansab nan rechèch laboratwa. Malgre limit li yo, tankou rezolisyon limite ak frajil, dènye pwogrè nan teknoloji jèl agaroz, ki gen ladan jèl segondè-rezolisyon, jèl pre-jete, ak aparèy mikwofluid ki baze sou agarose-, te elaji sèvis piblik li yo ak amelyore pèfòmans li. Kòm rechèch syantifik kontinye avanse, poud agarose pral san dout rete yon reyaktif ki gen anpil valè ak esansyèl nan byoloji molekilè ak zouti byoteknoloji.
Baj popilè: agarose poud cas 9012-36-6, Swèd, manifaktirè, faktori, wholesale, achte, pri, esansyèl, pou vann