Sephadex G75se yon kalite filler filtre jèl ak bon pèfòmans. Li se prepare pa crosslinking dextran ak epichlorohydrin. Li se yon jèl ki gen fòm chaplèt ak yon gwo kantite lajan nan gwoup idroksil, ki se fasil vin anfle nan dlo ak solisyon elektwolit. Limit esklizyon maksimòm sa a konpoze sa a se 80000, ak degre nan espesifik anfle depann sou kantite lajan an nan résine sèk ak kondisyon opere. Pou egzanp, nan sèten kondisyon, degre nan anfle nan résine sèk ka 519ml/g. Lè ranje nan pH opere se 6.210 (5.210 pou kèk pwodwi), konpoze an ka rete estab. Li rekòmande nan magazen li nan tanperati chanm, fre, ak lwen limyè nan seri a tanperati a 430 degre (oswa 425 degre) yo kenbe pèfòmans li yo ak estabilite. Sibstans sa a se patikilyèman apwopriye pou biomolekul gwo ak yon pwa molekilè ki pi gran pase 80000. sitou itilize pou desalination ak ranplasman tanpon nan tankou biomolecules gwo. Atravè yon operasyon etap yon sèl -, li posib byen vit desalinate, retire polyan, ak molekil transfere nan yon nouvo solisyon tanpon. Anplis de desalination ak ranplasman tanpon, Sephadex G-75 se tou apwopriye pou pwosesis la pou pirifye nan biomolecules gwo.
 |
 |
Sephadex G75se yon jèl dextran, ki se sitou itilize pou teknoloji a separasyon ak pou pirifye nan byochimik ak biyoloji molekilè. Itilizasyon prensipal sibstans sa a se jan sa a:
Nan pwosesis la desalination, li ka efektivman retire sèl (anjeneral ti molekil sèl inòganik) soti nan solisyon byolojik molekilè. Avantaj ki genyen nan sibstans sa a se ke li se fasil yo opere, vit, epi yo ka reyalize desalman efikas san yo pa chanje aktivite a nan biomolekul. Anplis de sa, akòz ekselan estabilite chimik li yo ak biocompatibility, li se apwopriye pou tretman desalination nan biomolecules divès kalite, ki gen ladan pwoteyin, peptides, asid nikleyik, elatriye nan aplikasyon pou pratik, jèl desale se nòmalman konbine avèk lòt teknoloji pou pirifye ak echanj ion, kromatografi.
Sa a sibstans ki sou gen yon pakèt domèn aplikasyon pou nan ranplasman tanpon, espesyalman nan jaden yo nan byochimik ak biyoloji molekilè. Pou egzanp, nan pwosesis la nan pirifye pwoteyin, li se pafwa nesesè yo transfere pwoteyin soti nan yon sistèm tanpon nan yon lòt sistèm tanpon ki se pi apwopriye pou estabilite yo ak aktivite. Ak sibstans sa a ka efektivman reyalize objektif sa a; Nan pwosesis la nan ekstraksyon asid nikleyik, li se tou nesesè yo separe asid la nikleyik soti nan solisyon an ki gen enpurte ak sèl, epi transfere li nan yon tanpon nouvo pou operasyon ki vin apre. Li se tou aplikab a senaryo sa a; Pandan kilti selil yo, pafwa li nesesè pou ranplase medyòm kilti a oswa tanpon pou kenbe kwasans selil ak aktivite. Li kapab itilize yo retire sibstans ki sou danjere soti nan medya kilti fin vye granmoun oswa tanpon ak prezante nouvo medya kilti oswa tanpon.
Molekilè tamatik
Nan rechèch pwoteyin ak pwosesis preparasyon, li se anjeneral nesesè yo separe pwoteyin sib soti nan melanj konplèks. Li ka separe pwoteyin ki baze sou gwosè yo, kidonk reyisi pou pirifye pwoteyin. Pa ajiste kondisyon yo elution, tankou fòs la ion ak valè pH nan eluent a, efikasite nan separasyon nan pwoteyin ka pli lwen optimisé. Anplis de pwoteyin ak asid nikleyik, li kapab tou itilize pou separasyon an ak pou pirifye nan lòt biomolekul, tankou polisakarid, anzim, antikò, elatriye vitès la mouvman nan sa yo biomacromolecules nan jèl depann sou gwosè yo ak fòm, konsa yo reyalize separasyon efikas. Malgre ke sibstans sa a pa itilize dirèkteman kòm yon zouti pou detèminasyon pwa molekilè, li ka sèvi kòm yon zouti oksilyè nan detèminasyon pwa molekilè.
Nan pwosesis pou pirifye pwoteyin, li se anjeneral nesesè yo retire ti enpurte molekil tankou sèl, ti metabolit molekil, ligand ki pa lye, elatriye soti nan solisyon an pwoteyin. Sa a sibstans ki sou ka efektivman retire sa yo enpurte molekil ti soti nan solisyon pwoteyin, kidonk amelyore pite a nan pwoteyin. Efè molekilè li yo pèmèt ti enpurte molekil sa yo dwe efektivman retire, sa ki lakòz pur asid nikleyik. Preparasyon anzim tipikman gen ti enpurte molekil tankou substrats unreacted, inhibiteurs, metabolites, elatriye sa yo enpurte ka afekte aktivite a ak estabilite nan anzim. Atravè filtraj la jèl nan materyèl la, sa yo ti enpurte molekilè ka efektivman retire ak pite a nan preparasyon an anzim ka amelyore. Anplis de pwoteyin ak asid nikleyik,
Simulation transduction siyal entèrselilè
Transduction siyal entè selilè se mekanis regilasyon debaz nan aktivite lavi, ki enplike pwosesis konplèks tankou rekonesans selil, konvèsyon siyal, ak repons fizyolojik. Rechèch tradisyonèl souvan depann sou modèl selil ap viv, men gen limit tankou rezo siyal konplèks ak plizyè faktè entèfere.Sephadex G75se yon medyòm filtraj jèl dextran klasik. Estrikti pore li yo ak efè molekilè Van bay yon modèl inik fizik pou similye transduction siyal entèrselilè.
Yon modèl fizik pou similye transduction siyal entèrselilè lè l sèvi avèk Sephadex G-75
Simulation nan rakor diferans entèrselulèr
Gap junction se yon kanal idrofil ki te fòme ant selil adjasan nan yon linker, sa ki pèmèt pou echanj gratis nan molekil ti ak yon pwa molekilè<1500 Da. The pore size range of Sephadex G-75 (40-300 μ m) is much larger than that of intercellular junctions (about 1.5 nm), but its porous structure can simulate molecular diffusion processes in local microenvironments. For example:
Fòmasyon gradyan nan molekil siyal: konsantrasyon diferan nan molekil siyal (tankou CAMP, CA ²+) yo chaje nan kolòn nan jèl. Ka diferans lan nan pousantaj difizyon nan molekil ti nan pò a jèl dwe obsève nan efè a Van molekilè, ak transmisyon an gradyan nan siyal chimik ant selil yo ka fo.
Simulation repons sinèrjetik: de molekil kominike (tankou ligand ak reseptè) yo chaje sou tou de bout nan kolòn nan jèl respektivman, ak cinétique obligatwa yo analize nan diferans nan tan elution simulation pwosesis la rekonesans molekilè nan kominikasyon an kontak dirèk ant selil yo.
Simulation nan kontak molekilè sou sifas manbràn
Kominikasyon ant molekil sifas manbràn yo depann sou entèraksyon espesifik pwoteyin sifas manbràn selilè yo. Sephadex G-75 ka simulation pwosesis sa a nan modifikasyon fonksyonèl:
Eksperyans reseptè ligand obligatwa: pwoteyin reseptè biotinylated (tankou EGFR) yo fiks sou sifas la nan patikil jèl, ligand fliyoresan ki make (tankou EGF) yo te kaptire nan sistèm nan streptavidin biotin, epi yo se entansite a siyal obligatwa ak yon detektè fluoresans nan quantify a reseptè Lange.
Analiz obligatwa konpetitif: PRELOAD konplèks la ligand reseptè nan kolòn nan jèl, ajoute inhibiteurs konpetitif nan konsantrasyon diferan (tankou anti antikò EGFR), kalkile konstan nan anpèchman (KI) nan chanjman nan pik elution, ak simulation efè a entèvansyon nan dwòg sou chemen siyal selil.
Simulation nan transmisyon siyal chimik
Transdiksyon siyal chimik depann sou difizyon molekil siyal chimik yo (tankou òmòn ak sitokin) sekrete pa selil nan likid kò oswa matris eksetera nan selil sib yo. Sephadex G - 75 ka konstwi yon modèl difizyon ki genyen twa dimansyon:
Simulation sistèm paracrine: selil sekresyon (tankou macrophages) ak selil sib (tankou selil T) yo respektivman enklizyon nan mikrosfè jèl, ak estati a aktivasyon nan selil sib (tankou ekspresyon CD69) obsève nan kilti CO simulation efè lokal la nan siyal paracrine.
Transmisyon siyal andokrin: òmòn fliyoresan ki make (tankou ensilin) yo chaje nan kolòn nan jèl, ak entèraksyon yo ak porositë jèl analize nan tan an elution, ak mwatye nan - nan òmòn nan sikilasyon san ak distribisyon sib ògàn yo prevwa pa konbine modèl matematik.
Ka Aplikasyon nan Sephadex G-75 nan rechèch siyal selil
Rechèch sou transduction siyal globil wouj ak fonksyon integrin
Plakèt adezyon reseptè integrin IIB 3 a se glikoprotein ki pi abondan sou sifas manbràn plakèt la epi li enpòtan pou emostazi ak fòmasyon tronb. Etidye itilize nan Sephadex G-75 simulation entèraksyon ki genyen ant plakèt ak kolagen an subendotelyal:
Modèl aktivasyon integrin: te pirifye integrin IIB 3 a fiks sou sifas la nan patikil jèl, ak soluble fibrinojèn (FG) te ajoute kòm ligand. Kinetik obligatwa a te detekte avèk sifas plasmon sonorite (SPR). Li te jwenn ke vokasyon a nan integrin nan FG apre aktivasyon te siyifikativman amelyore (KD te redwi soti nan μ M a NM).
Depistaj dwòg antiplatelet: Precarch integrin FG konplèks nan kolòn jèl, ajoute dwòg antiplatelet nan konsantrasyon diferan (tankou tirofiban), kalkile pousantaj la anpèchman nan dwòg sou aktivite integrin pa elution deplasman pik, epi yo bay yon gwo {{0}
Règleman nan chemen siyal ki gen rapò ak timè
Selil timè ankouraje pwopagasyon ak metastaz nan aktivasyon nòmal nan wout siyal tankou MAPK ak PI3K/Akt. Sephadex G-75 ka itilize yo izole ak pirifye pwoteyin kle nan wout siyal:
EGFR siyal chemen rechèch: EGFR pwoteyin te pirifye pa Sephadex G-75 jèl filtraj, ak estati fosforilasyon li yo te analize pa spectrometry mas. Li te jwenn ke nivo a fosforilasyon nan Y1068 ak Y1086 sit nan EGFR te siyifikativman ogmante apre eksitasyon EGF, ki aktive en ERK1/2 ak AKT siyal.
Dwòg rezistans mekanis analiz: Nan dwòg - rezistan selil kansè nan gastric (SGC7901/VCR), UHRF1 pwoteyin te izole ak pirifye pa Sephadex G-75, epi li te jwenn ke overexpression li yo ka anpeche aktivasyon an nan apoptoz pwoteyin (tankou caspase-3).
Iminitè selil siyal ak règleman polisakarid
Polisakarid alg wouj (BFP) amelyore repons iminitè a pa aktive NF - κ B ak MAPK wout siyal nan macrophages. Rechèch sou separasyon an ak pou pirifye nan BFP ak konpozan li yo (F1, F2, F3) lè l sèvi avèk Sephadex G-75:
Polysaccharide component analysis: BFP, F1, F2 and F3 with purity>95% yo te jwenn nan Sephadex G-75 filtraj jèl konbine avèk DEAE Cellulose 52 ion echanj kwomatografi, ak pwa molekilè yo te 120 kDa, 85 kDa, 60 kDa ak 45 kDa, respektivman.
Aktivasyon chemen siyal: nan modèl macrofaj RAW264.7, BFP ak konpozan li yo ka siyifikativman pwovoke sekresyon nan NO ak TNF -, ak mekanis li yo enplike nan NF - κ B Nikleyè Translokasyon ak fosforilasyon nan JNK, ERK, ak P38 MAPK. Konpozan yo pirifye separe pa Sephadex G - 75 te montre ke F1 te gen efè a aktivasyon pi fò sou NF - κ B ak MAPK wout (ogmante pa gen okenn pwodiksyon pa 2.5 fwa ak TNF - sekresyon pa 3 fwa).
Baj popilè: Sephadex G75 CAS 37224-29-6, Swèd, manifaktirè, faktori, en, achte, pri, esansyèl, pou vann